诱导大鼠骨髓间质干细胞分化为神经细胞的研究进展

摘要

锁阳为锁阳科锁阳属植物锁阳CynomoriumsongaricumRupr。干燥内质茎,常寄生于蒺藜科白刺属(NatrariaL.)植物根上,生于沙漠地带,主产于中国西北地区。锁阳在中、蒙药中是常用药,具补肾、助阳、益精、润肠之功效。近年研究发现,锁阳能够促进人体细胞再生和新陈代谢,增强免疫调节功能,具有明显的抗癌抗毒、延缓衰老的作用。因而探讨锁阳含药血清体外定向诱导骨髓间质干细胞向神经细胞分化的方法对骨髓间质干细胞替代疗法的研究具有积极的意义。通过在无菌条件下取SD大鼠股骨骨髓细胞做原代培养,根据贴壁培养筛选法体外传代、增殖和纯化MSCs的研究中发现,当细胞传至第三代后,利用锁阳含药血清定向诱导骨髓间质干细胞进行体外诱导,可以诱导骨髓间质干细胞向神经元转化。观察分化过程中以免疫细胞化学法中神经细胞标志Nestin、MAP-2、GFAP的表达来检测细胞种类、形态以及数目的变化，应用流式细胞仪观察细胞增殖周期，并计算转化率。观察发现锁阳含药血清诱导后，MSCs能分化为具有典型神经元形态的细胞并明显表达Nestin、MAP-2，而GFAP的表达量并无增高趋势。其中空白血清组的诱导效果明显低于含药血清组(P<0.05);低剂量组与高剂量组之间的差别有统计学意义(P <0.05)。因此得出结论:体外分离和培养骨髓间质干细胞可通过贴壁法培养，锁阳含药血清具有诱导骨髓间质干细胞向神经细胞分化的作用。