Livin和Smac在尖锐湿疣组织中的表达及意义

摘要

尖锐湿疣(condyloma acuminatum，CA)，是一种常见的性传播疾病(sexuallytransmitted disease，STD)，由人类乳头瘤病毒(human papilloma virus，HPV)感染所致，临床表现主要为生殖器等部位的良性疣状增生物，但部分还可转化为恶性肿瘤。该病常见于中青年人群，主要通过性接触传播，少数患者可由间接接触传染。CA具有传染性强、增生快、治疗后易复发等特点，严重影响患者生活质量，对社会及家庭危害极大，因而日益受到人们的重视，被列为国家重点检测的性传播性疾病之一。
　　 细胞凋亡异常与肿瘤的发生发展关系密切，细胞凋亡是由多种基因共同作用的结果。Livin是近年来发现的一种新的凋亡抑制基因，是细胞凋亡抑制蛋白家族(IAPs)中的一个新成员。Livin最早是从人类基因组cDNA文库中克隆得到的，主要通过直接抑制Caspase的活性而实现，其BIR区与Caspase结合，从而抑制Caspase的活性，尤其是抑制Caspase3、Caspases7、Caspases9等的活性，达到阻断细胞凋亡的目的，在肿瘤的发生发展过程中起着非常重要的作用。Smac是一种促进细胞凋亡基因，能选择性地结合IAPs成员（如Livin、survivin等）的BIR结构域，解除IAPs对Caspase的抑制而达到促进细胞凋亡的目的。
　　 CA虽是一种良性增生性疾病，但部分可形成巨大型CA(giantcondylomaacuminatum,GCA),又称Buschke-loewenstein肿瘤，少数病例还可能转化为恶性肿瘤，这可能与CA组织中存在凋亡相关基因的异常表达有关。目前虽有少数关于CA组织中细胞凋亡的文献报道，但凋亡相关基因Livin和Smac在CA组织中缺乏相关的研究。为探讨CA组织中Livin、Smac的表达及其意义，我们应用免疫组化SP法检测58例CA组织和20例正常包皮组织中Livin、Smac的表达情况，并探讨它们在CA发病中的可能作用。
　　 材料与方法
　　 1.材料
　　 58例CA病例均来自我院2008年8月～2009年6月皮肤性病科门诊患者，所有病例临床表现典型，组织病理诊断明确，原位杂交证实为HPV感染。其中男34例，女24例；年龄18～56岁，平均27.15±8.58岁；病程21～120天，平均58.19圭4.12天。所有病例取材前均未接受免疫性药物、激光、冷冻等治疗，无其它系统疾病。对照组为20例泌尿外科门诊手术切除的正常成年男性包皮组织，并经组织病理学证实为正常上皮组织。
　　 2.方法
　　 应用免疫组化SP法检测58例CA组织和20例正常包皮组织中Livin和Smac的表达情况，操作步骤均按试剂盒说骧进行。评分标准参照文献，根据组织切片中阳性细胞百分数和着色强度进行半定量分级评分。阳性细胞百分数＜10％为0分，11％～25％为1分，26％～50％为2分，51％～75％为3分，≥76％为4分。着色强度：0分，不着色；1分，浅黄色；2分，黄色；3分，棕黄色。取上述两项分值的乘积作为总积分：0分为阴性(-)，1～4分为弱阳性(+)，6～8分为阳性(++)，9～12分为强阳性（+++）。
　　 3.统计学处理
　　 利用SPSS13.0统计软件包对所得数据进行处理，采用x2检验和Spearman相关检验分析，P<0.05为差异有统计学意义。
　　 结果：
　　 1.Livin在CA组织和正常上皮中的表达
　　 Livin阳性显色为棕黄色颗粒，表达于细胞的胞质和脆核，但以胞质表达为主。58例CA组织中有47例Livin阳性表达，阳性表达率81.03％(47/58)，表达强度多在++～+++，阳性细胞呈局灶性或弥漫性分布，但在棘层表达较为显著。20例正常组织中Livin阳性表达5例，阳性表达率25.00％(5/20)，表达强度多在-～++。两组阳性表达率有统计学差异(x2=21.013，P＜0.05），且两组阳性表达强度差异有统计学意义(x2=22.571，P<0.05)。
　　 2.Smac在CA组织和正常上皮中的表达
　　 Smac阳性显色为棕黄色颗粒，主要表达于细胞的胞质。58例CA组织中有45例Smac阳性表达，阳性表达率77.59％(45/58)，表达强度多在++～+++，阳性细胞呈局灶性或弥漫性分布，但在棘层表达较为显著。正常对照组阳性表达率35.00％(7/20)，表达强度多在-～++。二者阳性率比较差异有统计学意义(x2=12.137，P＜0.05)，且两组阳性表达强度差异有统计学意义(x2=12.580，尹＜0.05)
　　 3.CA组织中Livin与Smac表达的相关分析
　　 47例Livin阳性中，有40例Smac阳性，7例Smac阴性。45例Smac阳性中，有40例Livin阳性，5例Livin阴性。通过Spearman等级相关分析发现，Livin与Smac的表达呈正相关(r=0.373，P=0.004)。
　　 结论：
　　 1.Livin在CA组织中的阳性表达率及阳性表达强度均高于对照组，提示Livin的过表达可能通过抑制CA组织细胞的凋亡，促进CA组织的异常增生。
　　 2.Smac在CA组织中的阳性表达率及阳性表达强度均高于对照组，提示Smac的过表达可能通过促进CA组织细胞的凋亡，抑制CA组织的增长。
　　 3.CA组织中Livin表达与Smac表达呈正相关，提示Smac的升高抑制了Livin的抗凋亡作用，二者共同影响CA的发生发展。

目录

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Livin和smac在尖锐湿疣组织中的表达及意义

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结论

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综述 Livin与肿瘤关系研究进展

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