子痫前期患者胎盘和血清中脂联素和抵抗素的表达及相关性

摘要

背景与目的:
　　 子痫前期(preeclampsia,PE)是妊娠期特有的疾病,是导致孕产妇和围产儿发病率和死亡率升高的主要原因,其病因及发病机制至今尚不清楚。其基本病理生理改变为妊娠妇女全身广泛的血管内皮细胞损伤,导致血管痉挛、肾小球损害及血管渗透性增加,从而引起高血压和蛋白尿。目前认为血管内皮细胞功能紊乱是子痫前期发病的重要环节。血管内皮细胞功能紊乱与血管内皮细胞的炎性反应、脂肪细胞的脂解作用以及胰岛素抵抗(IR)有关,脂联素(Adiponectin)和抵抗素(Resistin)同为脂肪细胞分泌的特异性激素蛋白,共同参与了血管内皮细胞的炎性反应。目前国内外关于脂联素和抵抗素在子痫前期中的表达存在着争议,本研究主要是通过检测脂联素和抵抗素在子痫前期胎盘和血清中的表达情况及相关性,以研究其在子痫前期发生发展中的作用及意义。
　　 脂联素(Adiponectin)也称Acrp30、AdipoQ、Gbp28,是由脂肪细胞分泌的一种激素蛋白。它能显著改善血管炎性反应,减少血管内皮细胞的损伤,它的表达水平降低能引起血管内皮细胞功能紊乱。脂联素作为一种脂源性分泌的血管内皮保护因子与子痫前期的关系为许多研究所关注,有研究表明在人类胎盘的绒毛细胞滋养细胞和合体滋养细胞存在脂联素、脂联素受体及脂联素mRNA的表达。但随着研究进展发现,脂联素在子痫前期中的表达量存在着争议。抵抗素(Resistin)是存在于血浆中的富含半胱氨酸的分泌性蛋白,同样是一种脂肪细胞来源的激素。人抵抗素基因在脂肪组织、胎盘、外周血的单核巨噬细胞及骨髓中均有表达。抵抗素的生理功能有消弱胰岛素的作用,产生胰岛素抵抗,参与细胞炎性反应,在细胞及体液免疫调节中亦起一定的作用。自发现抵抗素以来,国内外研究的重点主要集中在其与肥胖、代谢综合征、糖尿病及动脉粥样硬化疾病之间的关系,近年来研究发现,抵抗素与妊娠及子痫前期有着密切的联系,但目前关于抵抗素在子痫前期中的表达量存在着争议,为此我们也进行如下研究以进一步探讨其在子痫前期中的表达及意义。
　　 本研究采用半定量逆转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerasechain reaction,RT-PCR)方法检测重度子痫前期和轻度子痫前期及正常孕妇胎盘组织中脂联素和抵抗素的表达情况,并用ELISA法检测血清脂联素和抵抗素在重度子痫前期和轻度子痫前期患者及正常孕妇中的表达水平,分析脂联素和抵抗素与子痫前期的关系,及两者之间的相关性,探讨两者在子痫前期发生发展中的作用及相关性,进一步揭示子痫前期可能的分子生物学发病机制。
　　 材料与方法:
　　 1、临床病例资料
　　 标本选自2009年5月至2009年12月在郑州大学第一附属医院妇产科住院的孕妇,其中正常妊娠组30例作为对照组,子痫前期患者40例作为实验组(其中轻度子痫前期20例,重度子痫前期20例)。子痫前期的诊断标准,参照乐杰主编的全国高等院校统编教材《妇产科学》(第7版)标准。两组孕妇年龄、身高、体重及孕周、孕次等一般资料经检验差异无统计学意义(均P>0.05)。所有病例均排除原发性高血压、心脏病、肾病、糖尿病、肝炎、血小板较少、甲状腺功能亢进等病史,无吸烟、饮酒、输血、免疫治疗病史等。分娩方式均选择剖宫产,无胎膜早破及感染征象。
　　 2、实验方法
　　 运用RT-PCR方法从基因水平分别检测子痫前期孕妇和正常孕妇胎盘组织中脂联素和抵抗素的表达,并应用ELISA法从蛋白质水平检测脂联素和抵抗素在子痫前期孕妇和正常孕妇血清中的表达水平。
　　 3、统计学分析
　　 本组数据采用SPSS13.0软件进行统计分析,结果以(x)±S表示,统计方法为定量资料采用单因素方差分析,两两比较用LSD-t检验,相关性分析采用Pearson统计学处理,以a=0.05为统计标准,P<0.05为差异有统计学意义。
　　 结果:
　　 1、脂联素mRNA和抵抗素mRNA在重度子痫前期胎盘组织中的表达量分别为(0.403±0.145)和(0.104±0.067),均低于正常对照组的(0.838±0.324)和(0.427±0.023),差异有统计学意义(P=0.001,P=0.000),在轻度子痫前期胎盘组中的表达量分别为(0.659±0.018)和(0.301±0.109),均低于正常对照组的(0.838±0.324)和(0.427±0.023),差异有统计学意义(P=0.001,P=0.000)。但轻、重度子痫前期比较差异无统计学意义(P=0.132,P=0.270)。
　　 2、脂联素蛋白和抵抗素蛋白在重度子痫前期血清中的表达量为(5.54±2.89)和(5.16±1.48),均低于正常对照组的(11.38±2.3)和(15.35±2.78),差异有统计学意义(P=0.001,P=0.000),在轻度子痫前期组血清中的表达量为(8.75±3.01)和(7.30±3.44),均低于正常对照组的(11.38±2.3)和(15.35±2.78),差异有统计学意义(P=0.001,P=0.000),但轻、重度子痫前期比较差异无统计学意义。(P=0.230,P=0.291)。
　　 3、进行两者相关性比较,脂联素和抵抗素在重度子痫前期患者胎盘及血清中的表达均呈正相关性(r=0.417,r=0.262,P均<0.05),但在轻度子痫前期及正常对照组中无相关性(P均>0.05)。
　　 结论:
　　 1、脂联素mRNA和及其蛋白在重度子痫前期胎盘组织及血清中的表达均低于正常对照组,提示其低表达在子痫前期的发生发展中可能起一定的作用。抵抗素mRNA和及其蛋白在重度子痫前期胎盘组织及血清中的表达均低于正常对照组,提示其低表达在子痫前期的发生发展中可能起一定作用。
　　 2、脂联素和抵抗素在重度子痫前期中的相关性,提示它们之间在子痫前期的发病中可能有协同作用,可能通过某些相关机制共同影响重度子痫前期的发生发展,可望为子痫前期的预测提供新的切入点。