T-SPOT.TB试验诊断结核性胸膜炎的临床应用及影响因素分析

摘要

研究背景：
　　结核性胸膜炎是引起胸腔积液的常见原因，在肺外结核病中较为常见，发病率仅次于淋巴结结核。胸腔积液结核分枝杆菌涂片和培养是结核性胸膜炎诊断的金标准，但是涂片阳性率较低，培养需要2-6周，耗时长，容易误诊和延迟诊断，导致严重后果。胸膜活检、胸腔镜检查等为有创性操作，很多患者不能耐受，存在一定的局限性，不能在临床广泛开展。目前结核性胸膜炎的诊断主要是通过病史、临床表现、影像学、实验室检查和治疗效果观察，确诊率较低。因此急需一种新的检查方法，辅助诊断结核性胸膜炎。
　　近年来，随着检验技术的不断发展，结核感染 T细胞斑点试验(tuberculous infection of T cells spot test，T-SPOT.TB)广泛用于结核病的辅助诊断。T-SPOT.TB由酶联免疫斑点技术（enzymelinked immunospot assay，ELISPOT）发展而来的，其技术原理为γ干扰素释放实验（interferon gamma release assays，IGRA）。目前国内外很多学者研究了 T-SPOT.TB实验诊断结核感染的临床应用价值。但这些报道主要是侧重肺结核方面，对肺外结核尤其是结核性胸膜炎的临床应用价值有待进一步研究。我们进行了本次实验，研究 T-SPOT.TB诊断结核性胸膜炎的临床应用价值及影响因素。
　　目的：
　　评价T-SPOT.TB对结核性胸膜炎的临床应用价值,分析影响T-SPOT.TB假阴性和假阳性的因素。
　　方法：
　　回顾性分析2013年1月至2015年12月渗出性胸腔积液住院患者180例，根据诊断标准，将患者分为结核性胸膜炎组和非结核性胸膜炎组。收集相关病史，患者入院后均行T-SPOT.TB、胸腔积液ADA、TB-AB检测，计算阳性率、敏感性、特异性，采用?2检验，将T-SPOT.TB检测结果与其它两种方法进行比较。通过单因素分析和多因素非条件logistic回归分析，研究导致T-SPOT.TB假阴性和假阳性的危险因素。采用Mann-Whitney U检验和Kruskal-Wallis检验比较不同分组间T-SPOT.TB斑点数的差异。P<0.05认为差异有统计学意义。
　　结果：
　　1. T-SPOT.TB、ADA和TB-AB三种实验方法检测结核性胸膜炎组的阳性率（82.24％、65.42%、61.68%）高于非结核性胸膜炎组（27.40%、43.84%、46.58%），差异有统计学意义（均P<0.05）。外周血T-SPOT.TB诊断结核性胸膜炎的灵敏度（82.24%）高于ADA（65.42%）和TB-AB（61.68%），差异有统计学意义（均P<0.05）。外周血T-SPOT.TB诊断结核性胸膜炎的特异度（72.60%）高于胸腔积液ADA（56.16%）和TB-AB（53.42%），差异有统计学意义（均P<0.05）。
　　2.T-SPOT.TB的假阴性单因素分析发现免疫抑制因素差异无统计学意义（P>0.05），年龄和BMI差异有统计学意义（均P<0.05）；多因素非条件logistic回归分析结果显示，与中青年结核性胸膜炎患者相比，老年患者导致T-SPOT.TB假阴性的可能性较高（OR=4.537，P=0.016）；与BMI18.5-25kg/m2的结核性胸膜炎患者相比， BMI≥25kg/m2的患者导致 T-SPOT.TB假阴性的可能性较大（OR=5.713，P=0.007）。
　　3.T-SPOT.TB的假阳性单因素分析显示既往结核史差异有统计学意义（P<0.05）。多因素非条件logistic回归分析结果显示，与既往无结核史的非结核性胸膜炎患者相比，既往有结核史的患者导致 T-SPOT.TB假阳性的可能性较大（OR=5.296，P=0.013）。
　　4.老年结核性胸膜炎患者经ESAT-6抗原刺激产生的SFCs明显低于中青年患者（U=551，P<0.001）。老年患者经CFP-10抗原刺激产生的SFCs明显低于中青年患者（U=510，P<0.001）。BMI<18.5kg/m2、BMI18.5-25kg/m2和BMI≥25kg/m2的结核性胸膜炎患者经ESAT-6抗原刺激产生的分别SFCs为50（29，79）/2.5×105PBMCs、57（43，65）/2.5×105PBMCs、19（4，34）/2.5×105PBMCs，三组进行比较分析，差异有统计学意义（H=22.15，P<0.001）；进一步两两比较BMI≥25kg/m2的结核性胸膜炎患者经 ESAT-6抗原刺激产生的 SFCs明显低于BMI18.5-25kg/m2的患者（P<0.001）。三组患者同时经CFP-10抗原刺激产生的SFCs分别为52（41，70）/2.5×105PBMCs、48（25，73）/2.5×105PBMCs、17（4，32）/2.5×105PBMCs，三组进行比较分析，差异有统计学意义（H=26.23， P<0.001）；进一步两两比较BMI≥25kg/m2的结核性胸膜炎患者经CFP-10抗原刺激产生的SFCs明显低于BMI18.5-25kg/m2组的患者（P<0.001）。既往有结核史的非结核性胸膜炎患者经ESAT-6抗原刺激产生的SFCs明显高于既往无结核史的患者（U=220，P=0.027）。既往有结核史的非结核性胸膜炎患者经CFP-10抗原刺激产生的SFCs明显高于既往无结核史的患者（U=198.5，P=0.011）。
　　结论：
　　1.T-SPOT.TB对结核性胸膜炎诊断的灵敏度、特异度较好，明显高于 ADA和TB-AB,具有重要的临床应用价值。
　　2.T-SPOT.TB不受免疫状态因素的影响，对免疫抑制合并结核性胸膜炎患者仍有较好的诊断价值。
　　3.老年和BMI≥25kg/m2患者是T-SPOT.TB假阴性的危险因素。怀疑结核性胸膜炎的老年和BMI≥25kg/m2的患者，T-SPOT.TB为阴性时，要考虑有没有假阴性的可能。
　　4.既往有结核史可能是 T-SPOT.TB假阳性的危险因素。既往有结核史的患者当T-SPOT.TB结果出现阳性时，不能盲目诊断为结核病。

目录

声明

缩略词表

前言

对象和方法

1 研究对象

2 检测仪器及试剂

3 实验方法

4 统计方法

结果

1 180例患者的一般资料

2 三种实验方法检测两组患者的阳性率比较

3 三种实验方法检测结核性胸膜炎患者的灵敏度比较

4 三种实验方法检测结核性胸膜炎患者的特异度比较

5 诊断假阴性危险因素分析

6 诊断假阳性危险因素分析

7 T-SPOT.TB斑点数与危险因素的联系

讨论

结论

参考文献

综述:T-SPOT.TB对结核病诊断研究进展

个人简介及在研期间科研成果

致谢