CD14+HLA-DR-/low髓源性抑制细胞在外周T细胞淋巴瘤中的生物学功能及临床意义

摘要

目的:观察外周T细胞淋巴瘤(peripheral T cell lymphoma，PTCL)患者外周血中CD14+HLA-DR-/low髓源性抑制细胞(myeloid-derived suppressor cell，MDSC)及T细胞亚群，探讨CD14+HLA-DR-/lowMDSC在PTCL中的生物学功能，同时观察CD14+HLA-DR-/lowMDSC及CD4+CD25+调节性T细胞(regulatoryT cell，Treg)在PTCL中的预后意义。
　　方法:流式细胞术检测33例PTCL患者和23例健康成人外周血中CD14+HLA-DR-/lowMDSC细胞和T细胞亚群;用免疫磁珠分选法分选CD3+T细胞、CD14+HLA-DR-/low MDSC细胞和HLA-DR+细胞，并用生物素标记的微磁珠(CD2/CD3/CD28)刺激扩增CD3+T细胞，进行共培养，流式细胞术分析不同浓度CD14+HLA-DR-/lowMDSC对自体CD3+T细胞增殖活性的影响。根据MDSC和Treg的中位数进行分组，分析各组之间临床特点和预后的关系。
　　结果:
　　1.PTCL患者CD14+单核细胞/白细胞的比为5.7％(0.70％-20.6％)、CD3+T淋巴细胞/淋巴细胞的比为61.37％(45.20％-76.40％)、CD19+B淋巴细胞/淋巴细胞的比为7.93％（0.10％-22.70％）、CD16+ CD56+NK细胞/淋巴细胞的比为30.60％(9.36％-49.70％)，各组与健康成人对照组之间差异均无统计学意义(P＞0.05)。淋巴细胞中CD4+CD45RO+T淋巴细胞/CD4+T淋巴细胞的比为60.00％(33.62％-87.23％)、CD4+CD45RA+T淋巴细胞/CD4+T淋巴细胞的比32.12％（6.67％-57.84％）、CD8+CD45RO+T淋巴细胞/CD8+T淋巴细胞比为44.20％（1.52％-67.01％）、CD8+CD45RA+T淋巴细胞/CD8+T淋巴细胞比为61.15％（5.06％-79.03％），上述各组与对照组之间差异亦无统计学意义(P＞0.05)。
　　2.PTCL患者外周血中CD14+HLA-DR-/low细胞/CD14+单核细胞为3.28％(0.40％-17.74％)，CD4+ CD25+Treg/CD4+T淋巴细胞为8.81％(0.76％-78.11％)均高于健康成人对照组，差异具有统计学意义(P＜0.05); PTCL患者外周血中 CD4+CD25+Treg/CD4.+T淋巴细胞的比值8.81％(0.76％-78.11％)与CD14+HLA-DR-/CD14+单核细胞的比值3.28％（0.40％-17.74％）呈正相关(相关系数r=0.510)，差异有统计学意义(P＜0.05)。
　　3.PTCL患者外周血中CD14+HLA-DR-/low细胞与T细胞比例为1∶1时对自体T细胞增殖活性的抑制最强;加入精氨酸酶1（arginase1，ARG1）抑制剂nor-NOHA后T细胞的增殖率可恢复至75.09±5.18％、加入吲哚胺2，3-双加氧酶(indoleamine2，3-dioxygenase，IDO)抑制剂1-MT后T细胞的增殖率可恢复至84.05±2.93％，IDO抑制剂和ARG1抑制剂联合组T细胞的增殖率可恢复至97.80±2.20％。
　　4.根据CD14+HLA-DR-/lowMDSC是否大于3.28％，分为高MDSC组和低MDSC组。低MDSC组3年总生存(over survival，OS)率为58.8％，中位生存时间为30(8～40)月;高MDSC组3年OS率为18.8％，中位生存时间为15(6～40)月。两组之间具有显著性差异（X2=5.134，P＜0.05）。PTCL患者根据国际预后指数(International prognostic index，IPI)分为低危组(IPI=0～1)和高危组（IPI=2～4）。高危组患者CD14+HLA-DR-/low/CD14+的比例4.65％(0.72％-17.74％)高于低危组患者2.80％(0.40％～5.66％)，差异具有统计学意义(T=192.000，P＜0.05)。根据CD4+CD25+/CD4+的比例是否大于8.81％，分为高Treg组和低Treg组。低Treg组3年OS率为60.6％，中位生存时间为32(8～40)月，高Treg组3年OS率为13.3％，中位生存时间为14(6～39)月，差异有统计学意义(X2=8.971，P＜0.05)。单因素分析显示IPI评分、CD14+HLA-DR-/low/CD14+、CD4+CD25+/CD4+是影响患者OS的危险因素(P＜0.05)。多因素分析显示PTCL外周血CD4+CD25+/CD4+比例是影响患者OS和无进展生存(progression-free survival，PFS)的危险因素(P＜0.05)。
　　结论:
　　1.PTCL患者外周血中存在CD14+HLA-DR-/loWMD SC细胞群，数量高于健康成人对照组。
　　2.免疫表型为CD14+HLA-DR-/low的细胞对T淋巴细胞增殖具有抑制作用，其作用机制可能和ARG1及IDO有关，CD14+HLA-DR-/lowMDSC比例与CD4+CD25+Treg比例正相关。
　　3.CD14+HLA-DR-/loWMDSC与PTCL的IPI评分及OS相关，PTCL外周血中CD14+HLA-DR-/loWMDSC和CD4+CD25+Treg比例增高是PTCL的不良预后因素。

目录

声明

摘要

图及附表目录

中英文缩略词对照

引言

第一部分：外周T细胞淋巴瘤患者外周血有核细胞MDSC的鉴定及生物学功能

前言

第1章 材料和方法

1．1 研究对象

1．2 主要实验器材及试剂

1．3 标本收集

1．4 流式细胞仪检测外周血有核细胞

1．5 流式细胞仪对CD14+HLA-DR-／lowMDSC功能的测定

1．6 统计学处理

第2章 结果

2．1 PTCL患者外周血单个核细胞

2．2 CD14+HLA-DR-／low细胞的功能

第3章 讨论

第4章 结论

第二部分：PTCL患者外周血CD14+HLA-DR-／lowMDSC与临床特征及预后的研究

前言

第1章 病例和方法

1．1 研究对象

1．2 治疗方案

1．3 疗效判定

1．4 随访

1．5 统计学处理

第2章 结果

2．1 临床特征

2．2 CD14+HLA-DR-／low／CD14+在PTCL患者中的相关临床因素分析

2．3 CD4+CD25+／CD4+细胞的比例在PTCL患者中的相关临床因素分析

2．4 治疗前后PTCL患者外周血CD14+HLA-DR-／low／CD14+细胞的比例和CD4+CD25+／CD4+细胞的比例的变化

2．5 33例初治的PTCL患者的多因素分析

第3章 讨论

第4章 结论

参考文献

综述 髓源性抑制细胞MDSC在恶性肿瘤中的研究进展

个人简历

在校期间发表的学术论文

致谢