MMP-10、Cav-1在食管癌表达水平变化以及与预后的相关性研究

摘要

食管癌(esophageal carcinoma，EC)，消化系统恶性肿瘤，在临床上较为常见[1]。EC在中东地区及非洲和部分欧洲地区具有较高的发生率，以中国北方，南非土耳其以及伊朗为高危患病地区，有调查研究显示，黑人的患病概率显著高于白人，患病概率约是白人的5倍，其中美国黑人所占比例高达83％[2]。目前国内外有关食管癌病因及机制尚缺乏统一观点，但既往已经有大量研究者[3-4]认为食管癌的发生和人口特征学的差异以及细胞水平均有关，在我国食管癌发生危险因子相似，除了种族、饮食及社会经济学地位和贲门失弛缓症、食管狭窄以及系统硬化病等危险因素外，不良饮食习惯，如硝酸盐摄入过多、食物中缺少维生素、高热量等，都是影响食管癌发生的因素[5]。近几年，欧美国家的食管腺癌的发病率大大升高，但是在我国，发病率最高的仍是鳞癌[6]。随着医学的不断发展，现在已经有很多治疗方法和手段，并且能够有效提高患者生存周期，但迄今为止仍然具有较低5年生存率，究其缘由可能和目前早期临床确诊困难有关，并予以治疗，对于防止复发和转移效果较差[7]。随着国内外医疗技术的不断发展，近几年出现的分子靶向治疗为临床治疗肿瘤方面提供了新思路，且也取得了较好的效果。在既往大量类似研究[8-9]发现诸多的生物靶点参与机体正常生理过程中，同时还与恶性肿瘤的发生及疾病的进展密切关联。且国外也有诸多学者[10-11]证实靶向药物应用于非小细胞肺癌患者已经取得非常良好的治疗效果，这也让我们在肿瘤治疗领域看到曙光。但以往有关靶向药物在食管癌治疗中应用效果鲜见报道，所以找到一种相对更精确、有效的分子标记物对于早期发现恶性肿瘤病灶而言至关重要，甚至充当食管恶性肿瘤治疗有效靶点成为可能。
　　细胞基因的编码异常导致了肿瘤的发生，除此之外还可原癌基因的激活、抑癌基因的失活等过程、DNA损伤以及其他相关微环境的异常等均存在密切关联[12]。肿瘤的恶性发展较为复杂，且过程较繁琐，且漫长，主要内容有肿瘤细胞粘附、基质降解，然后随血液远处转移等，以肿瘤基质降解过程尤为关键[13]。鉴于大部分肿瘤早期患者未出现典型的临床症状，加之肿瘤大多存在早期远处转移趋势，因此大多数恶性肿瘤预后一般较差。可见探究一种和肿瘤发生及进展机制相关的以及和整个过程进展相关的调控因子成为目前业界学者关注的热点和重点[14]。国外学者[15]将MMP-10和Cav-1作为影响肿瘤恶性进展的重要指标，且得到越来越多人的关注和认可。
　　既往研究[16]发现，基质金属蛋白酶-10(Matrix metalloproteinase-10，MMP-10)在恶性肿瘤中的表达量显著高于癌旁组织，也有学者[17]比较食管癌患者和健康人群食管粘膜组织MMP-10基因表达情况，结果发现，与健康组相比，食管癌粘膜组织中的MMP-10基因的表达量明显增高。陈小嫦等[18]人也通过研究证实，食管癌患者血清中小窝蛋白-1（caveolin-1，cav-1）含量较高，可以作为标志物。类似的研究还有很多，通过近几年的研究，发现二者可能与肿瘤侵袭、新生血管形成及转移和复发等预后均有关。
　　研究目的：
　　探讨基质金属蛋白酶-10（Matrix metalloproteinase-10，MMP-10）、小窝蛋白-1（caveolin-1，Cav-1）在食管癌患者血清中的表达情况，并进行两者表达水平与患者临床预后间的相关性分析，旨在为食管癌患者诊疗及预评估提供参考。
　　研究方法：
　　选取驻马店市第一人民医院2012年1月至2014年4月期间收治入院的食管癌患者68例作为观察组，所有患者均胃镜取病理组织活检确诊食管癌及分期;并选取同期在院体检的正常食管黏膜组织20例，纳入对照组。采用免疫组化SP法检测MMP-10蛋白的表达，采用Western blotting法检测Cav-1，比较观察组对照组Cav-1及MMP-10阳性表达情况以及和临床病理间的关系，并分析Cav-1、MMP-10表达情况和食管癌患者临床病理特征关系，分析影响Cav-1、MMP-10基因表达因素，并根据性别、年龄、肿瘤直径、浸润程度、TNM分期、分化程度及是否发生淋巴结转移等分组，比较不同临床病理特征食管癌患者Cav-1、MMP-10阳性表达率的情况，并将上述存在统计学差异的因素作为自变量分别进行Cav-1、MMP-10阳性表达影响因素的Logistic回归性分析。此外，分析Cav-1、MMP-10两者阳性表达间的相关性以及Cav-1、MMP-10表达和食管癌患者预后相关性。
　　研究结果：
　　1.观察组病例MMP-10、Cav-1阳性表达率分别为85.29％，77.94％;对照组分别为25.00％，15.00％，组间统计差异显著(x2分别为27.624，26.458，P均＜0.01）。观察组MMP-10mRNA及Cav-1mRNA表达量分别为（2.73±1.05）、（3.69±1.32），均显著高于对照组的（0.49±0.09）、（1.02±0.56），组间统计差异显著，t值分别为9.492，8.788，P均＜0.01。
　　2.MMP-10及Cav-1表达和食管癌临床病理学特征关系:
　　MMP-10阳性表达率在不同浸润程度、TNM分期中存在统计学差异，Z值分别为2.620，3.467，P值分别为0.022，0.001;且伴/不伴淋巴结转移患者MMP-10阳性表达率经统计，x2=25.312，P＜0.01。
　　Cav-1阳性表达率在不同浸润程度、TNM分期中存在统计学差异，Z值分别为2.486，4.186，P均＜0.05;且伴/不伴淋巴结转移患者Cav-1阳性表达率经统计，x2=24.993，P＜0.01。
　　3.经过因素Logistic回归分析:肿瘤浸润食管外膜、Ⅲ+Ⅳ期及发生淋巴结转移均是食管癌患者癌组织MMP-10、Cav-1阳性表达的影响因素，P均＜0.05。
　　4.经pearson相关性分析，食管癌患者癌组织MMP-10表达和Cav-1表达存在一定正相关性，r=0.594，P＜0.05。
　　5.不同TNM分期食管癌患者临床总有效率存在统计学差异(P＜0.05)，且Ⅰ期、Ⅱ期及Ⅲ期食管癌总有效率显著高于Ⅳ期。早期16例出现Ⅰ级恶心、呕吐，9例出现白细胞计数减少，均为轻度。
　　6.最终随访66例，2例丢失，随访率97.06％，中位随访时间为26个月。随访1年、2年及3年生存率分别为89.39％、61.76％和41.17％。且随随访时间的逐渐延长，MMP-10、Cav-1阳性表达率呈现降低趋势，但未见统计学差异(P＞0.05)。
　　7.经分析，是否发生淋巴结转移、MMP-10和Cav-1的阳性表达均会影响食管癌生存时间，所以临床实践中可以将上述指标作为食管癌独立预测因子。
　　研究结论：
　　1.食管癌癌组织MMP-10、Cav-1阳性表达率明显较食管正常组织高，且MMP-10mRNA、Cav-1mRNA表达量也显著高于正常食管组织。
　　2.食管外膜浸润、TNMⅡ+Ⅲ期以及发生淋巴结转移是食管癌组织MMP-10、Cav-1阳性表达的高危因素。
　　3.食管癌患者癌组织MMP-10、Cav-1二者阳性表达存在一定正相关性。
　　4.随随访时间的逐渐延长，MMP-10、Cav-1阳性表达率呈现降低趋势，但无统计学差异。
　　5.淋巴结转移、MMP-10及Cav-1阳性表达可作为食管癌患者预后的独立预测因子。

目录

声明

摘要

中英文缩略词对照

前言

资料与方法

1 研究资料

2 实验方法

3．治疗

4．随访

5．观察指标及判定标准

6 统计学分析

结果

1．MMP-10、Cav-1在观察组和对照组中的表达差异

2．MMP-10表达和食管癌临床病理学特征关系探讨

3．Cav-1表达情况和食管癌临床病理特征关系分析

4 食管癌患者癌组织MMP-10、Cav-1表达多因素Logistic回归分析

5．MMP-10、Cav-1在食管癌患者癌组织中表达相关性分析

6．食管癌患者治疗效果及不良反应分析

7．随访1～3年生存率及MMP-10、Cav-1阳性检出率分析

8．生存率单因素Log-rank检验及多因素

讨论

结论

参考文献

综述 MMP-10、Cav-1在食管癌表达水平变化以及与预后的相关性研究

个人简历

致谢