斯钙素1基因在中华大蟾蜍和小鼠上皮组织的表达研究

摘要

斯钙素(stanniocalcin,STC)是一类首先在鱼类发现的同型二聚体糖蛋白激素,随后在大鼠、人等哺乳动物中也发现了STC的存在。STC在鱼类主要由特有的内分泌泌腺体一斯坦尼氏小体(corpuscles of Stannius,CS)分泌,哺乳类和两栖类有卵巢、肾脏等多种组织广泛表达。STC在钙磷调节、能量代谢、炎症反应、血管生成、妊娠与泌乳、细胞凋亡等方面有重要作用。
　　 (1)为了研究STC1在两栖动物上皮组织的表达规律,实验以中华大蟾蜍(Bufo bufogargarizans)蝌蚪及成体为材料,利用RT-PCR技术检测STC1 mRNA在蝌蚪发育过程及环境钙处理下蝌蚪和成体皮肤、小肠、肾脏组织的变化规律;用定磷法检测中华大蟾蜍环境钙处理下成体皮肤、小肠、肾脏组织Ca2+-ATP酶的变化规律。休眠状态和非休眠状态下皮肤、小肠、肾脏组织STC1基因mRNA水平和Ca2+-ATP酶活性的比较。结果表明,高钙环境在处理初期促进STC1基因表达量的增加,持续处理则抑制其表达;低钙环境对STC1基因的表达几乎没有影响,持续处理也抑制STC1基因的表达。皮肤和小肠组织STC1基因对高钙环境较敏感,肾脏不敏感。高钙状态下,Ca2+-ATP酶活性变化与对应组织的STC1基因的表达趋势一致,而低钙环境对Ca2+-ATP酶性活没有影响。休眠状态下皮肤、小肠、肾脏组织的STC1基因表达和Ca2+-ATP酶活性显著低于非休眠状态。
　　 (2)为了研究STC1在哺乳动物皮肤创伤愈合中的作用,实验以深Ⅱ度烫伤小鼠为材料,利用RT-PCR技术检测皮肤损伤区域STC1 mRNA在不同处理下的表达规律。结果表明,小鼠皮肤深Ⅱ度烫伤自然愈合过程中损伤区域皮肤STC1 mRNA的表达呈现先升高再降低再升高再降低的趋势。0.2 mg/g EGCG处理能降低损伤皮肤愈合早期STC1mRNA水平,而在晚期(240 h)则提高STC1 mRNA水平。美宝湿润烧伤膏处理可在第6 h,48 h和240 h显著提高STC1 mRNA的水平。

目录

文摘

英文文摘

论文说明:缩略词表

第一章 文献综述

1 鱼类 STC 的研究

1.1 鱼类 STC 基因的组织表达模式

1.2 鱼类 STC 的调节

1.3 鱼类 STC 分子结构

1.4 鱼类 STC 的作用机制

2 哺乳动物 STC 的研究

2.1 哺乳动物 STC 的表达模式

2.2 哺乳类 STC 的分子结构及表达调控

3 两栖动物 STC 的研究概况

4 Ca2+-ATP酶的研究概况

5 皮肤创伤面修复

5.1 皮肤创伤面修复的基本过程

5.2 细胞炎症因子在皮肤创伤面修复中的作用

6 表没食子儿茶素没食子酸酯

6.1 表没食子儿茶素没食子酸酯简介

6.2 EGCG 的作用

7 本课题的立题依据、重要意义及研究方法

7.1 立题依据和重要意义

7.2 研究方法

第二章 环境钙对中华大蟾蜍 STC1 基因和 Ca2+-ATP 酶活的影响

1 材料和方法

1.1 实验材料

1.2 实验方法

2 结果

2.1 中华大蟾蜍蝌蚪发育过程中 STC1 基因的表达

2.2 环境钙对中华大蟾蜍蝌蚪 STC1 基因表达的影响

2.3 环境钙对成体中华大蟾蜍皮肤、小肠、肾脏STC1基因表达的影响

2.4 环境钙对成体中华大蟾蜍皮肤、小肠、肾脏Ca2+-ATP酶活力的影响

2.5 环境钙对成休眠期与非休眠期中华大蟾蜍皮肤、小肠、肾脏STC1 mRNA水平的变化

2.6 休眠期与非休眠期中华大蟾蜍皮肤、小肠、肾脏Ca2+-ATP酶活性变化3 讨论

3 讨论

3.1 中华大蟾蜍蝌蚪 STC1 基因在发育过程中的表达及钙离子对其的影响

3.2 成体中华大蟾蜍皮肤、小肠、肾脏组织 STC1 基因在环境钙影响下变化趋势分析

3.3 成体中华大蟾蜍皮肤、小肠、肾脏组织 Ca2+-ATP 酶活力在环境钙影响下变化趋势分析

3.4 中华大蟾蜍皮肤、小肠、肾脏组织 STC1 mRNA 水平休眠期与非休眠期的变化分析

3.5 中华大蟾蜍皮肤、小肠、肾脏组织Ca2+-ATP酶活力在休眠期与非休眠期的变化分析

4 结论

第三章 表没食子儿茶素没食子酸酯对烫伤小鼠皮肤愈合过程中 STC1 基因表达的影响

1 材料和方法

1.1 实验材料

1.2 试验方法

2 结果

2.1 小鼠烫伤皮肤在自然愈合过程中 STC1 基因的表达

2.2 不同浓度 EGCG 处理对 STC1 基因表达的影响

2.3 烧伤治疗药膏与0.2 mg/g EGCG 对 STC1 基因表达的影响

3 讨论

3.1 小鼠皮肤烫伤后自然愈合过程中 STC1 基因的表达分析

3.2 不同浓度 EGCG 处理对 STC1 基因表达影响的分析

3.3 烧伤治疗药膏与 EGCG 对 STC1 基因表达影响的比较

4 结论

参考文献

致谢

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