中国大鲵精子活力研究

摘要

人工催产性腺发育成熟的雄性中国大鲵（Andrias davidianus），对得到的精子开展了形态结构、活力判定及保存方法研究，旨在为大鲵的规模化繁育提供足量的活力精子:
　　 1.光学显微镜下，中国大鲵精子头部通常呈辣椒状、棒状和环状，尾部弯曲或呈直线状。电子显微镜观察，大鲵精子头部呈辣椒状、棒状和球状，精子长度为200±20μm，精子头部为细胞核所在位置，头部约占全长的三分之一。
　　 2.活力精子判定特征及判定方法:
　　 ①活力精子所在的精液浓稀适中、色白、无污物（如粪便、肠道寄生原虫等）;
　　 ②显微镜下观察，活力精子分离成单个，无成团、结块现象;
　　 ③显微镜下观察，活力精子形态正常，无残缺、无畸形;
　　 ④显微镜下观察精滴（不压片观察），精滴周边的活力精子显现快速运动，精滴中心的活力精子则呈现攒动现象;
　　 ⑤将精液涂片（压片或不压片）观察，可见活力精子快速运动;
　　 ⑥显微镜下，将精液滴加在一拉伸的新鲜大鲵卵带上，可见活力精子沿卵带朝同一方向直线运动。
　　 3.催产20尾雄性大鲵，催产率达90％，但产活力精子雄鲵的比例只有20％，表明雄性不育的比例高达80％。
　　 4.适宜硬度范围内，大鲵活力精子存活时间随水体硬度升高而缩短，其中当水体硬度为0.41mmol/L时，大鲵精子最长存活161s;硬度为3.14mmol/L时，大鲵精子最长存活65s。
　　 5.20℃下，大鲵精子在山泉水中的存活时间为124.8s，表现为颤动;在任氏液中存活92.4s，也表现为颤动;在空卵带上精子被迅速激活，精子的寿命为340.8s;在精子原液中保存效果最好，为21600s，精子表现为缓慢运动。
　　 6.随光照强度的上升，大鲵精子在原液中的存活时间急剧下降，光强为2-3lux，存活21600s，光强76-80lux，存活339.6s，光强900-930lux存活289.8s。
　　 7.20℃条件下，从初次采到精子到精子活力消失或无精子持续7d。

目录

摘要

第一章 文献综述

1．1 中国大鲵分类地位

1．2 大鲵自然分布状况

1．3 大鲵自然资源保护状况

1．4 大鲵形态特征

1．5 中国大鲵繁殖生物学研究现状

1．5．1 中国大鲵生殖系统的形态学观察

1．5．2 中国大鲵精子和卵子的研究

1．5．3 中国大鲵的胚胎发育

1．6 人工繁殖研究进展

1．6．1 亲鲵培育

1．6．2 雌雄鉴别

1．6．3 催产季节

1．6．4 催产

1．6．5 人工授精

1．6．6 大鲵精液研究

1．6．7 大鲵人工繁殖存在的问题

1．7 精子活力研究

1．7．1 鱼类精子活力研究

1．7．2 鱼类精子活力评价方法

1．7．3 鱼类精子活力评价指标

1．7．4 大鲵精子活力评价方法

1．8 本研究的目的和意义

第二章 中国大鲵精子形态结构及活力判定

2．1 材料与方法

2．1．1 雄性亲鲵的催产

2．1．2 精子的采集

2．1．3 试剂与样品的制备

2．1．4 精子的观察

2．2 结果

2．2．1 精子活力的判定

2．2．2 光镜下精子的形态

2．2．3 扫描镜下精子的形态

2．3 讨论

2．3．1 活力精子与无活力精子的区别

2．3．2 采集精子时应注意的事项

2．3．3 关于大鲵精子的形态结构

2．3．4 关于大鲵精子的活力判定

第三章 水体硬度、保存液、光照对大鲵精子活力的影响

3．1 材料和方法

3．1．1 人工催产、精子采集、活力精子判定

3．1．2 不同硬度的水配制

3．1．3 不同保存液的配制

3．1．4 光照强度的设置

3．1．5 精子存活时间的观察

3．1．6 催产后精子活力持续情况

3．2 结果

3．2．1 催产后雄性亲鲵的行为和生理变化

3．2．2 催产率及产活力精子雄鲵的比例

3．2．3 活力精子在不同硬度水体中的存活时间

3．2．4 不同保存液中精子的存活时间

3．2．5 催产后精子活力持续趋势

3．2．6 不同光照强度下精子的存活时间

3．3 讨论

3．3．1 提高大鲵繁殖率的措施

3．3．2 水体硬度对活力精子存活时间的影响

3．3．3 水体离子与大鲵精子的激活及抑制

3．3．4 关于大鲵精液的保存

3．3．5 光照对大鲵精子活力的影响

参考文献

致谢

攻读硕士学位期间发表的论文目录

声明