声明
第1章 文献综述
1.1 哺乳动物卵母细胞冻存的原理及损伤机理
1.2 哺乳动物卵母细胞冻存的发展概况
1.3 哺乳动物卵母细胞保存的意义
1.4 卵母细胞冷冻特性分析
1.4.1 体积大不易脱水
1.4.2 为单个细胞
1.4.3 细胞内脂肪比较丰富
1.4.4 卵母细胞的发育阶段
1.5 卵母细胞冻存损伤分析
1.5.1 透明带损伤
1.5.2 细胞膜损伤
1.5.3 染色体异常损伤
1.5.4 分子损伤
1.5.5 细胞骨架损伤
1.6 玻璃化冻存展望
1.7 转录组测序技术（RNA-Seq）
1.8 本研究的目的与意义
第2章 液氦玻璃化冷冻对牛未成熟卵母细胞发育潜力的影响
2.1 前言
2.2 材料和方法
2.2.1 实验仪器及耗材
2.2.2 实验试剂以及配制方法
2.3 试验方法
2.3.1 实验设计
2.3.2 卵巢的采集和运输
2.3.4 试验分组
2.3.5 液氮玻璃化冷冻
2.3.6 液氦玻璃化冷冻
2.3.7 卵母细胞的解冻
2.3.8 卵母细胞的体外成熟
2.3.9 体外受精（IVF）
2.3.10 胚胎体外培养
2.4 统计分析
2.5 实验结果
2.6 讨论
2.6.1 玻璃化冷冻温度对牛未成熟卵母细胞发育潜力的影响
2.6.2 玻璃化冷冻保护剂浓度对卵母细胞发育潜力的影响
第3章 液氦玻璃化冷冻对牛未成熟卵母细胞mRNA转录组的影响
3.1 前言
3.2 材料与方法
3.2.1 实验仪器及耗材
3.2.2 实验试剂及配制方法
3.3 试验方法
3.3.1 实验设计
3.3.2 卵巢的采集与运输
3.3.3 卵丘-卵母细胞复合体的收集
3.3.4 实验分组
3.3.5 液氮玻璃化冷冻
3.3.6 液氦玻璃化冷冻
3.3.7 卵母细胞的解冻
3.3.8 卵母细胞的体外成熟
3.3.9 卵母细胞的裂解
3.3.10 扩增与建库
3.3.11 差异基因数据分析
3.3.12 差异基因文献查阅
3.4 实验结果
3.4.1 样品间的相似性
3.4.2 各个样品检测到的基因数目
3.4.3 四个处理组的差异基因数目
3.4.4 四个处理组间的共同差异基因数目
3.4.5 差异基因的GO功能分类
3.4.6 筛选出的与卵母细胞密切相关的差异基因
3.4.7 KEGG通路富集
3.5 讨论
3.5.1 冷冻损伤反映到卵母细胞mRNA转录水平上
3.5.2 玻璃化冷冻对线粒体相关基因表达的影响
3.5.3 玻璃化冷冻对脂肪代谢相关基因表达的影响
3.5.4 玻璃化冷冻对早期胚胎发育和细胞分裂相关基因表达的影响
3.5.5 玻璃化冷冻对能量代谢相关基因表达的影响
3.5.6 玻璃化冷冻对细胞微丝微管相关基因表达的影响
3.5.7 玻璃化冷冻对卵母细胞受精活动相关基因表达的影响
第4章 结论
参考文献
缩略语词汇表
致谢
攻读学位期间的研究成果
