杜仲新产品的研发及杜仲叶中绿原酸的纯化工艺研究

摘要

杜仲Eucommia ulmoides Oliv.为杜仲科杜仲属植物，又名思仙、仙仲、木棉、丝绵树及玉丝皮等，是我国特产的名贵中药材。杜仲皮和叶已收载于《中国药典》。我国在东汉初期就有利用杜仲的文献记载。鉴于杜仲的药用和保健价值，我国也加快了杜仲相关产品的综合开发步伐，并逐步向产业化发展。
　　本文综述了杜仲的化学成分和药理活性，比较了不同工艺参数对杜仲系列酒中绿原酸、京尼平苷、京尼平苷酸、桃叶珊瑚苷的含量，优化了杜仲系列酒的制备工艺。建立了HPLC法测定杜仲叶中绿原酸、京尼平苷、京尼平苷酸含量的方法，比较了不同品种杜仲叶中三种有效成分的含量。同时还对不同品种杜仲叶中六种黄酮成分的含量进行了测定，意在考察不同品种的杜仲叶的保健价值;对杜仲叶中绿原酸的分离纯化工艺进行了研究。这将会对杜仲相关产品的开发应用提供理论依据。
　　本文结果如下:
　　一、建立了HPLC法测定杜仲系列酒中绿原酸、京尼平苷、京尼平苷酸的含量测定方法，最佳色谱条件是:色谱柱:Thermo Hypersil Gold C18(250mm×4.6mm×5μm);以甲醇-水-乙酸(15∶85∶1)溶液为流动相进行等梯度洗脱;柱温:25℃，流速:1.0mL/min;检测波长:237nm。结果显示不同系列的杜仲酒中三种次生代谢产物含量有差异。可能与不同的配比及工艺参数有关。
　　二、用高效液相色谱法测定杜仲系列酒中桃叶珊瑚苷的含量，考察用不同配比方法的杜仲酒对桃叶珊瑚苷含量的影响。结果显示:用不同配比及处理方法的杜仲酒对桃叶珊瑚苷的含量有影响。
　　三、建立了RP-HPLC法同时测定了杜仲叶中六种黄酮(槲皮素-3-0-葡萄糖(1→2)葡萄糖苷、槲皮素-3-0-阿拉伯糖(1→2)葡萄糖苷、槲皮素-3-0-葡萄糖苷、异鼠李素-3-0-β-D-葡萄糖苷、紫云英苷、槲皮素）含量的方法。确定最佳色谱条件是:采用ThermoHYPERSIL C18(BDS250mm×4.6mm×5μm)色谱柱，梯度洗脱，检测波长360nm，柱温25℃，流速1.0 ml/min。在此条件下，分别对不同品种的杜仲叶进行含量测定，发现了不同品种的杜仲叶中这六种黄酮含量相差很大。杜仲红叶中六种黄酮的含量最高，有1.46％。同时还对不同品种杜仲叶中三种次生代谢产物进行了测定。为杜仲系列酒的研发提供理论基础。
　　四、杜仲叶中绿原酸的纯化工艺:采用50％乙醇加热回流提取、固液比1∶10，PH=2，回流2次，每次30min。将提取液经过活性炭脱色，1％的壳聚糖溶液絮凝后采用HPD100大孔吸附树脂吸附，用50％乙醇以2.0mL/min的流速进行洗脱，每份收集100mL，纯化液再经过活性炭脱色，之后冷冻干燥得到22％粗品，再经乙酸乙酯正己烷双相萃取得36.8％的绿原酸粗品。

目录

声明

摘要

第一章 绪论

第一节 杜仲研究概论

1 历代杜仲的利用范围

2 现代对杜仲的利用范围

3 杜仲的药理活性

4 杜仲次生代谢产物的主要类型

第二节 杜仲的综合利用开发研究现状

1 杜仲中药的发展现状

2 杜仲保健食品的发展现状

3 杜仲功能饲料研发与产业化开发研究现状

4 杜仲橡胶资源与产业发展现状

第三节 杜仲叶中绿原酸的研究现状

第四节 立题依据及研究思路

第二章 杜仲系列酒中相关有效成分的含量测定

第一节 HPLC法测定杜仲系列酒中京尼平苷酸、绿原酸、京尼平苷的含量

1 仪器与试药

2 方法与结果

3 结论

4 小结

第二节 HPLC法测定不同系列酒中桃叶珊瑚苷的含量

1 仪器与试药

2 方法与结果

3 结论

4 讨论

第三章 杜仲叶中相关成分的含量测定

第一节 HPLC法同时测定杜仲叶中六种黄酮类成分的含量

1 仪器与试药

2 方法与结果

3 讨论

4 小结

第二节 HPLC法测定不同品种杜仲叶中京尼平苷酸，绿原酸，京尼平苷的含量

1 仪器与试药

2 方法与结果

3 讨论

4 小结

第四章 杜仲叶中绿原酸的纯化工艺研究

第一节 杜仲叶中绿原酸的纯化工艺

1 大孔吸附树脂的介绍

2 上样液的制备及处理

3 蒸馏水除杂考察

4 洗脱剂用量考察

5 进一步纯化方法的探索

6 小结

参考文献

致谢