慢性肾衰竭大鼠HGF、MMP-2及TIMP-2的动态变化及其在慢性肾衰竭发病机制中的作用研究

摘要

目的：通过研究慢性肾衰竭(Chronical renal failure, CRF)大鼠肾组织中肝细胞生长因子（Hepatocyte growth factor， HGF）、基质金属蛋白酶-2（Matrix metalloproteinases-2, MMP-2)及基质金属蛋白酶-2抑制剂（Matrix metalloproteinases-2, TIMP-2）表达的动态变化及三者的相关性，探讨HGF延缓CRF进程的可能机制。
　　方法：给大鼠腺嘌呤250mg·kg-1·d–1灌胃建立CRF模型，对照组同体积2％淀粉溶液灌胃。2组分别于实验第7天、14天、21天留取尿标本后，各处死大鼠10只，取血、肾脏标本，测定体重（BW）、24小时尿蛋白定量(24-hTP)、尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖酐酶(NAG)、肾重指数（肾脏重量/体重）（KI）、血肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）、血白蛋白(ALB)；HE和Masson染色观察肾小管－间质病理形态学改变；免疫组化检测正常对照组、CRF模型组HGF、MMP-2及TIMP-2的表达。
　　结果：第7天时CRF模型组大鼠与同时相点正常对照组相比， BW、24hU-TP、尿NAG酶、KI、Scr和BUN均明显升高（P﹤0.01/P﹤0.05），ALB无明显变化；第14天时模型组大鼠与前一时相点（第7天时）比较，BW、24hU-TP、尿NAG酶、KI、Scr和BUN进一步升高（P﹤0.01），血ALB与同组前一时相点比较有明显降低；第21天时模型组大鼠与第14天时CRF模型组大鼠比较，BW、24hU-TP、尿NAG酶、KI、Scr和BUN继续升高（P﹤0.01），血ALB与同组前一时相点比较显著降低（P﹤0.01）。
　　肾组织病理变化：对照组肾小管间质基本正常。随灌胃时间延长，CRF模型组见肾小管扩张、上皮细胞空泡变性，炎细胞浸润，间质纤维组织灶性增生。第21天,肾小管明显萎缩及消失，间质广泛纤维化。
　　免疫组化示：正常肾间质几乎无HGF表达。与对照组相比,第7天CRF模型组HGF表达明显增加(P<0.05)，第14天、21天HGF缓慢下降(P<0.01)；对照组均有MMP-2、TIMP-2的表达。对照组肾组织偶见TIMP-2强阳性表达。较对照组,第7天模型组MMP-2表达明显增加(P<0.01)；第14天、21天，MMP-2缓慢下降(P<0.01)；与对照组相比，模型组大鼠TIMP-2随时间延长持续升高(P＜0.05或P<0.01)。灌胃第7天, HGF、MMP-2表达明显增加至第14、21天, HGF、MMP-2表达缓慢下降；TIMP-2持续上升。
　　结论： HGF表达与MMP-2表达呈正相关,与TIMP-2呈负相关。HGF抗肾间质纤维化作用可能与MMP-2、TIMP-2密切相关。

目录

中文摘要

英文摘要

1 前 言

2 材料和方法

2.1 实验材料

2.2 实验方法

2.3 统计学方法

3 实验结果

3.1 一般状况

3.2 大鼠尿量和体重变化

3.3大鼠肾重、肾重指数变化

3.4大鼠血ALB 变化

3.5肾功能的改变

3.6 肾脏病理组织学改变

3.7 相关性分析

4 讨 论

4.1 慢性肾衰竭大鼠模型的制备

4.2 肾间质纤维化发生机制

4.3 HGF、MMP-2及TIMP-2在RIF进展中的作用。

5 结 论

参考文献

致谢

附录A 英中文术语和缩略语对照表

附录B 个人简历

附录C 综述:肝细胞生长因子与肾脏纤维化的逆转