目的:本课题拟通过不同剂量下氯仿经口给药、腹腔注射以及吸入染毒,研究禁食对氯仿代谢和肝毒性影响,探讨肝脏酶诱导的剂量依赖作用,为禁食对毒物在体内的毒性及代谢改变的研究提供理论和实践上的参考.方法:选用8周龄Wistar雄性大鼠,正常喂养至10周龄时,随机分为2组,每组65只,第一组(禁食组)整夜禁食,大鼠从实验前一天下午16:00时禁食至实验当天上午10:00时,期间仅喂水;第二组(喂养组)正常喂食.禁食对肝脏微粒体蛋白、CYP450含量及体外氯仿代谢影响的测定:取禁食组和喂养组大鼠各5只,断头处死后切除肝脏,用磷酸缓冲溶液配置25％(w/v)肝组织匀浆,离心后测定GSH含量;其余部分进一步离心,并与缓冲液再次缓冲后按照Lowry方法测定其蛋白成份保存备用.微粒体蛋白含量和CYP450酶含量按照Omura方法进行分光光度测定.并用Sato和Nakajima平衡测定法,通过酶底物消失率的改变,定量体外氯仿代谢.氯仿给药:取禁食组大鼠60只,随机分为12个小组,1-4组分别吸入0,50,100、500ppm氯仿气体6小时,5-8和9-12组分别经口和腹腔注射给药,给予0,100,200、400mg/kg氯仿,24小时后进行指标测定.喂养组60只大鼠同步操作,方法相同.给药大鼠在实验当天16:00时开始持续喂食、喂水.指标测定:从鼠尾采血20 μl,用Sato et al气相色谱方法,测定血液中氯仿浓度.生物化学测定:用Ellman方法测定经氯仿染毒24小时后大鼠肝脏GSH含量,用速率法测定血清中GOT和GPT含量.结论:1.与喂食组相比,禁食使氯仿体外代谢速度增加近3倍(P<0.05).2.禁食对氯仿体内代谢产生明显影响,影响程度因给药途径和剂量不同而不同.3.禁食增强了氯仿的肝毒性,但毒性增强程度因给药途径和剂量不同而不同.
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