还原型谷胱甘肽抗单侧输尿管结扎大鼠肾间质纤维化作用机制研究

摘要

目的:肾间质纤维化(renal interstitial fibrosis,RIF)是各种肾脏疾病进展至终末期肾功能衰竭所共有的病变过程。病变肾组织中肾间质纤维化程度比肾小球硬化程度更加影响患者肾功能的水平[1]。肾间质纤维的程度是影响肾脏10年存活率的最重要的影响因素。也就是说如果能够有效的防治肾间质纤维化,就能够有效的保护肾脏功能。因此,对于肾间质纤维化的发生、发展的防治已成为肾脏病学者热切关注的课题。还原型谷胱甘肽(glutathione,GSH)具有重要的抗氧化作用和解毒作用[2]。在临床工作中我们发现还原型谷胱甘肽对肾脏功能具有保护作用[3-4],但其确切机制尚末明了,对于这种机制的研究有助于评价还原型谷胱甘肽在治疗肾脏病中的意义。单侧输尿管接扎(UUO)是一个成熟的肾间质纤维化模型,肾小球病变不明显,本试验以此动物模型为平台,选用还原型谷胱甘肽干预,通过观察肾脏病理改变、免疫组织化学方法检测核因子-κB(NF-κB),转化生长因子(transforming growth facter-β,TGF-β1)的表达变化,从细胞水平探讨还原型谷胱甘肽抗肾间质纤维化,保护肾功能的机制
　　 方法:将健康雄性SD大鼠54只随机分为假手术组(Sham-operatedrats,Sham组)和手术组(UUO组)、GSH治疗组(GSH组)。GSH组术后即给予还原型谷胱苷肽注射液400mg/kg/d腹腔注射,Sham组及UUO组腹腔注射等体积的生理盐水。实验期间大鼠给与自由进食水,动物饲养环境温度18～28℃,相对湿度40～60％,定时日光照射12h/d。术后3天、7天、14天分批处死,每次随机处死6只。检测血尿素氮、血肌酐、肾组织中超氧化物歧化酶(T-SOD)、还原型谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)含量。肾组织HE、Masson染色,免疫组织化学ABC法检测核因子-κ(B(NF-κB),转化生长因子(ttansforming growth fatter-β1,TGF-β1)在肾组织中的表达。
　　 结果:①术后第3天、7天、14天Sham大鼠血尿素氮、肌酐、T-SOD、MDA及GSH均无明显变化(P＞0.05);术后第3天、7天、14天UUO组大鼠血尿素氮、肌酐及MDA进行性升高,T-SOD进行性下降,与Sham组相比有显著差异(P＜0.05);GSH组术后第3天、7天、14天与Sham组相比大鼠血尿素氮、肌酐及MDA也有显著升高,T-SOD、GSH下降,也有显著差异(P＜0.05),但与UUO组在术后对应的时间点相比,血尿素氮、肌酐及MDA升高幅度均显著降低,T-SOD、GSH下降幅度显著减少(P＜0.05);②Sham组术后肾脏病理无明显变化,UUO组各时间点肾间质损伤程度比Sham组和治疗组严重;③免疫组化结果表明Sham组NF-κB,TGF-β1均有少量表达,UUO组上述指标表达在第3天、7天、第14天组均明显表达,GSH组在各时间点NF-κB,TGF-β1的表达均低于UUO组(P＜0.05),但高于Sham组(P＜0.05)。
　　 结论:单侧输尿管结扎可造成大鼠肾间质纤维化,氧化应激在肾间质纤维化中起到一定的作用。还原型谷胱甘肽可以在一定程度上减轻UUO大鼠肾间质纤维化程度。其机制可能与抑制肾脏局部氧化应激减少,下调NF-κB、TGF-β1水平有关。