IL-17在活动期系统性红斑狼疮患者外周血CD4+T细胞中的表达及临床意义

摘要

目的：系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus，SLE)是一种弥漫性、全身性的自身免疫性疾病，可累及皮肤粘膜、骨骼肌肉、消化系统、血液系统、中枢神经系统及肺脏、心脏、肾脏、胰腺等脏器，血清中可检测到多种自身抗体和免疫学异常，其临床表现复杂，病程迁延反复，严重影响了患者的生活质量和生存率，尤其是育龄女性。随着肾上腺皮质激素及免疫抑制剂应用于临床，系统性红斑狼疮患者的生活质量及生存率均已显著改善。但目前治疗方法均有一定的不良反应或弊病，严重影响了患者治疗的依从性和预后。SLE患者迫切地需要一种特异性的免疫治疗方法。然而系统性红斑狼疮的病因和发病机制至今仍未完全阐明，但是现代分子免疫学的快速发展，已经为系统性红斑狼疮发病机制的探索开辟了新途径。
　　目前多数研究者认为免疫耐受的破坏是系统性红斑狼疮主要发病机制之一。T细胞是机体免疫耐受建立和维持的重要细胞，其功能异常可能是狼疮患者发病的重要机制之一，但T细胞在系统性红斑狼疮中的作用并不十分明确。初始CD4+T细胞在不同细胞因子诱导下，表达不同的转录因子，分化成为功能及表型不同的四大亚群：Th1、Th2、Treg(调节性T细胞)及Th17。传统认为，在系统性红斑狼疮的发病机制中，主要是Th1/Th2产生的细胞因子失衡起重要作用，但是对于Th1、Th2细胞的研究一直未给系统性红斑狼疮的发病机理带来新的突破，同时Th17细胞的发现也对传统的发病机制提出了新的挑战。国内外的研究现今集中在新发现的Treg细胞和Th17细胞上，特别是Th17细胞同传统的Th1、Th2及Treg细胞有明显不同的特征，具有独立分化和发育过程，主要通过分泌白介素-17(interleukin-17，IL-17)等多种效应因子参与炎症过程，在介导慢性炎症、宿主防御和自身免疫性疾病及肿瘤发病中发挥重要作用，成为免疫反应研究的中心环节。
　　有研究表明，Th17细胞通过STAT3信号转导通路上调转录调节因子RORγt的表达，从而编码表达IL-17并发挥其生物学效应，但Th17细胞在SLE中的致病机制尚不清楚。IL-17是Th17细胞的标志性细胞因子及主要的效应因子，并且主要由Th17细胞分泌表达。目前多数研究认为IL-17在自身免疫性疾病的发生、发展过程中有重要的临床意义，与SLE的发生、发展密切相关，并与疾病活动指标有关；然而部分研究却不支持IL-17在狼疮中的作用。本研究通过研究IL-17在SLE患者中的表达率，推测Th17细胞的生物学功能，进一步探讨CD4+T细胞在SLE中的致病机制，期望可以对系统性红斑狼疮的发病机制有更进一步的认识，并为将来开展特异性免疫学治疗提供一定的理论依据。
　　方法：试验对象分三组：系统性红斑狼疮组(A组)34例，均处于活动期，符合1997年美国风湿病协会修订的SLE分类标准；其他结缔组织病组(B组)26例，为随机抽取同期诊治的其他结缔组织病患者(包括类风湿性关节炎、系统性硬皮病、皮肌炎、多发性肌炎、干燥综合症、系统性血管炎)，均符合各自的国际诊断标准；另设性别年龄匹配的健康人作对照(C组)16例。取外周抗凝血，通过流式细胞术(FCM)检测CD4+IL-17+T细胞的比例；记录各组临床指标及实验室指标如ESR、CRP、补体水平、免疫球蛋白、抗核抗体、抗双链DNA滴度、受累脏器等及系统性红斑狼疮疾病活动度评分(Systemic Lupus Erythematosus DiseaseActivity Index.SLEDAI)。应用SPSS19.0统计软件进行统计分析，比较各组CD4+IL-17+T细胞表达率有无差异，观察CD4+IL-17+T细胞表达率与临床指标、实验室指标的相关性，及系统性红斑狼疮组CD4+IL-17+T细胞表达率与SLEDAI的相关性。
　　结果：
　　1各组外周血中CD4+IL-17+T细胞表达率系统性红斑狼疮组和其他结缔组织病组外周血中CD4+IL-17+T细胞表达率均高于健康对照组(P<0.05)；但系统性红斑狼疮组与其他结缔组织病组外周血中CD4+IL-17+T细胞表达率之间没有统计学差异(P>0.05)。
　　2 SLE组患者CD4+IL-17+T细胞表达率与疾病活动指数SLEDAI的相关性分析SLE患者外周血中CD4+IL-17+T细胞表达率与SLEDAI评分呈正相关(r=0.353，P=0.047)，但中低活动度组SLE患者与重度活动组狼疮患者CD4+IL-17+T细胞表达率之间无明显统计学差异(P>0.05)。
　　3 SLE组患者CD4+IL-17+T细胞表达率与各项临床指标之间的关系CD4+IL-17+T细胞表达率与关节炎、肌炎有关，存在关节炎、肌炎的SLE患者外周血中CD4+IL-17+T细胞表达率高于无关节炎、肌炎的SLE患者(P<0.05)；而与肾损害、中枢神经系统损害、浆膜炎、粘膜溃疡、发热、新发皮疹、ANA及抗dsDNA滴度无明显关系(P>0.05)。
　　4 SLE组患者CD4+IL-17+T细胞表达率与实验室指标间的相关性分析CD4+IL-17+T细胞表达率与PLT、β2MG水平呈正相关(r=0.543，P<0.001；r=0.406，P=0.017)，且血小板升高患者CD4+IL-17+T细胞表达率高于血小板正常患者(P<0.01)；而与IgG、补体C3、ESR、CRP、WBC、NE％、LY％及HGB水平无明显相关性(P>0.05)，但WBC减少患者CD4+IL-17+T细胞表达率低于WBC正常患者。
　　结论：
　　1系统性红斑狼疮及其他结缔组织病患者外周血内CD4+IL-17+T细胞表达升高，IL-17参与多种自身免疫性疾病包括系统性红斑狼疮的发病过程，提示Th17细胞在系统性红斑狼疮的发病机制中具有一定作用。
　　2系统性红斑狼疮患者外周血中CD4+IL-17+T细胞的表达与SLEDAI评分呈正相关，在一定程度上可以反映系统性红斑狼疮疾病活动性。
　　3 IL-17与反映体液免疫状态的β2MG水平呈正相关，推测Th17细胞可以通过IL-17激活体液免疫反应。
　　总之，深入探讨SLE患者外周血中IL-17的免疫学功能，不仅有助于完善系统性红斑狼疮中Th17细胞的致病机制，而且为探索新的疾病特异性干预靶点提供依据，有助于寻找特异性免疫干预治疗的新途径。