慢性阻塞性肺疾病大鼠肺组织MMP-8、MMP-9、MMP-12和TIMP-1、TIMP-4的表达及辛伐他汀对其的影响

摘要

目的:观察基质金属蛋白酶(matrixmetalloproteinases，MMP-8、MMP-9、MMP-12)和金属蛋白酶组织抑制因子(Tissueinhibitorofmetalloproteinase，TIMP-1、TIMP-4)在慢性阻塞性肺疾病(chronicobstructivepulmonarydisease，COPD)大鼠肺组织中的表达，探讨MMP-8、MMP-9、MMP-12和TIMP-1、TIMP-4在COPD发病中的作用及降脂治疗对其的影响。
　　 方法:
　　 1采用烟熏法建立COPD动物模型。将30只大鼠随机分为三组:对照组、烟雾暴露组及辛伐他汀组。除对照组外，另外两组大鼠每日在熏烟箱内烟雾暴露，每日2次，每次吸烟20支，每次吸烟1小时，共4个月，自烟雾暴露之日起给予辛伐他汀组辛伐他汀（5mg/kg）治疗，于烟雾暴露前大鼠灌胃，每日一次。4个月后，测量大鼠体重、计数支气管肺泡灌洗液(bronchveolarlavagefluid，BALF)中白细胞数量及分类，并对肺组织病理形态学进行观察。
　　 2采用免疫组化方法对大鼠肺组织MMP-8、MMP-9、MMP-12和TIMP-1、TIMP-4蛋白的表达进行检测;应用Real-TimePCR方法对肺组织中MMP-8、MMP-9、MMP-12mRNA和TIMP-1、TIMP-4mRNA的表达进行测定，观察辛伐他汀对其表达的影响。
　　 结果:
　　 1三组大鼠实验前体重无明显差异(P＞0.05)。实验结束时，烟雾暴露组大鼠体重较对照组明显下降(P＜0.01);辛伐他汀组大鼠体重较对照组大鼠体重显著下降(P＜0.01)，较烟雾暴露组体重略增加，但二者无统计学意义(P＞0.05)。烟雾暴露组BALF白细胞总数、中性粒细胞百分率及巨噬细胞百分率相对于对照组，明显增多（均P＜0.01），淋巴细胞百分率略下降，但无统计学意义(P＞0.05)。内衬间隔（pulmonarymeanlinearintercept）及支气管壁厚/外径(bronchialwallthickness/diameter，BWT/D)显著增加（P＜0.01），平均肺泡数(meanalveolarnumbers)显著降低(P＜0.01)。辛伐他汀治疗后，白细胞总数较烟雾暴露组比较明显下降（P＜0.01），中性粒细胞百分率下降(P＜0.05)，淋巴细胞百分比及巨噬细胞百分率略下降，但无统计学意义(P＞0.05);MAN、MLI及BWT/D无明显改变（均P＞0.05）。
　　 2应用免疫组化方法研究MMP-8、MMP-9、MMP-12和TIMP-1、TIMP-4在肺组织中的表达。与对照组比较，烟雾暴露组肺组织中MMP-8、MMP-9、MMP-12和TIMP-1、TIMP-4蛋白表达升高，与烟雾暴露组比较，辛伐他汀治疗后MMP-8、MMP-9、MMP-12的蛋白表达降低，TIMP-1、TIMP-4蛋白表达升高。
　　 3应用RT-PCR检测MMP-8、MMP-9、MMP-12mRNA和TIMP-1、TIMP-4mRNA在大鼠肺组织中表达。烟雾暴露组MMP-8mRNA的表达较对照组升高(P＜0.01)，是对照组的（7.71±0.87）倍;烟雾暴露组MMP-9mRNA的表达较对照组升高（P＜0.01），是对照组的(8.02±3.43)倍;烟雾暴露组MMP-12mRNA的表达较对照组升高(P＜0.01)，是对照组的（6.89±2.53）倍;烟雾暴露组TIMP-1mRNA的表达升高(P＜0.01)，是对照组的(5.18±1.44)倍;烟雾暴露组TIMP-4mRNA的表达升高(P＜0.01)，是对照组的(2.58±0.42)倍;与烟雾暴露组比较，辛伐他汀治疗后MMP-8mRNA降低（P＜0.05），是对照组的(3.62±2.20)倍。辛伐他汀治疗后MMP-9mRNA降低(P＜0.05)，是对照组的（3.37±0.26）倍。与烟雾暴露组比较，辛伐他汀治疗后MMP-12mRNA降低，但无统计学意义(P＞0.05)，是对照组的(3.52±1.49)倍;辛伐他汀治疗后TIMP-1mRNA升高，但无统计学意义(P＞0.05)，是对照组的(6.71±2.60)倍;与烟雾暴露组比较，辛伐他汀治疗后TIMP-4mRNA升高，但无统计学意义(P＞0.05)，是对照组的(3.61±0.38)倍。
　　 结论:
　　 1大鼠香烟烟雾暴露4个月建立COPD动物模型成功。给予辛伐他汀治疗后，COPD大鼠肺泡内白细胞总数及中性粒细胞百分率等下降。
　　 2MMP-8、MMP-9、MMP-12和TIMP-1、TIMP-4在COPD发生、发展过程中有明显的变化及联系，在COPD发生发展中起重要作用。辛伐他汀治疗通过改善两者失衡状态，可能是治疗COPD有效的机制之一。

目录

声明

摘要

英文缩写

引言

第一部分 慢性阻塞性肺疾病大鼠模型的建立及辛伐他汀的作用

前言

材料与方法

结果

附图

附表

讨论

小结

参考文献

第二部分 慢性阻塞性肺疾病大鼠肺组织MMP-8、MMP-9、MMP-12和TIMP-1、TIMP-4的表达及辛伐他汀对其的影响

前言

材料与方法

结果

附图

附表

讨论

小结

参考文献

结论

综述

致谢

个人简历