加味桔梗汤提取工艺研究及对小鼠肺水肿预防效果的评价

摘要

随着抗生素类药物在畜牧业的广泛应用，导致耐药菌株越来越多，细菌的耐菌谱也越来越广，同时给动物食品安全带来了严峻挑战。因此，绿色、无残留的抗菌、抗病毒中草药在兽药生产中具有广阔的应用前景。本试验的目的是对自拟方剂加昧桔梗汤(金荞麦40g、鱼腥草25g、桔梗8g、甘草8g)的最佳工业化水提工艺进行研究，并对其油酸导致的小鼠肺水肿的预防效果进行评价，以期用以治疗与呼吸系统有关疾病。
　　本研究的内容包括几个方面:
　　1、对桔梗、甘草、金荞麦、鱼腥草药材进行鉴别。方法为理化鉴别、显微鉴别和性状鉴别，结果均符合《中国兽药典》的标准。
　　2、对4种单味中草药和自拟方剂的水提液进行体外抑菌试验。方法:选择了大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌和副鸡嗜血杆菌这些常见的细菌，牛津杯法测抑菌圈直径，固体培养基连续稀释法测最小抑菌浓度。结果:牛津杯法显示出金荞麦和鱼腥草对大肠埃希菌、铜绿假单胞菌敏感性低，配伍方剂对细菌的敏感性相对较高。固体培养基连续稀释法显示4种中草药和配伍方剂水提液对大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、副鸡嗜血杆菌四种标准菌株均有抑菌效果，且配伍方剂的最小抑菌浓度相对较低。
　　3、考虑到浸泡时间、料液比、提取时间、提取次数等因素能对水提工艺产生影响，采用L9(34)正交试验表的方法，以浸膏得率、甘草酸含量和芦丁含量为考察指标筛选最佳工艺。结果:加味桔梗汤的最佳水提工艺为共煎煮3次，第一次12倍量的水浸泡2h，煎煮2h，第二次10倍水煎煮1.5h，第三次8倍量的水，煎煮1h。
　　4、试验小鼠分为对照组、病理模型组和预防组，预防组连续7天以1mL/100g的剂量早、晚灌胃最佳水提工艺提取的加味桔梗汤，其余两组灌胃生理盐水。第八天病理模型组和预防组小鼠尾静脉注射油酸致肺水肿，两天后剖杀，观察肺脏病理变化，比较3组之间肺系数、肺含水量和肺湿重与肺干重比值，并做肺脏的病理切片。结果:加味桔梗汤对小鼠肺水肿有很好的预防效果，组间差异显著。
　　因此，本试验自拟的加味桔梗汤有很好的抑菌效果，筛选出了最佳水提工艺，并能对肺水肿起到一定的预防效果，为临床应用提供了一定基础。

目录

声明

摘要

1 引言

1．1 桔梗概述

1．1．1 桔梗主要化学成分

1．1．2 桔梗药理作用

1．1．3 桔梗提取工艺

1．2 甘草概述

1．2．1 甘草主要化学成分

1．2．2 甘草药理作用

1．2．3 甘草提取工艺

1．3 金荞麦概述

1．3．1 金荞麦主要化学成分

1．3．2 金荞麦药理作用

1．3．3 金荞麦提取工艺

1．4 鱼腥草概况

1．4．1 鱼腥草主要化学成分

1．4．2 鱼腥草药理作用

1．4．3 鱼腥草提取工艺

1．5 桔梗汤的研究进展

1．6 研究方法和目的

2 药材的鉴定

2．1 材料

2．1．1 中草药

2．1．2 试剂

2．1．3 展开剂和溶液配制

2．1．4 仪器与设备

2．2 试验方法

2．2．1 中草药粉末制备

2．2．2 药材的理化鉴别

2．2．3 药材的显微鉴别

2．3 结果

2．3．1 性状鉴别

2．3．2 理化鉴别结果

2．3．3 显微鉴别结果

2．4 讨论

2．5 小结

3 体外抑菌试验

3．1 材料

3．1．1 标准菌株

3．1．2 中草药

3．1．3 培养基

3．1．4 仪器设备

3．2 方法

3．2．1 药液的制备

3．2．2 培养基制备

3．2．3 菌液的准备

3．2．4 牛津杯法测抑菌直径试验

3．2．5 固体培养基连续稀释法测最小抑菌浓度试验

3．2．6 结果判定标准

3．3 结果

3．3．1 牛津杯法

3．3．2 固体培养基连续稀释法

3．4 讨论

3．5 小结

4 加味桔梗汤水提工艺的筛选

4．1 材料

4．1．1 中草药

4．1．2 对照品

4．1．3 试剂

4．1．4 仪器设备

4．2 方法

4．2．1 处方组成

4．2．2 正交试验的设计

4．2．3 加味桔梗汤水提液的制备

4．2．4 水提液浸膏含量测定

4．2．5 甘草酸含量测定

4．2．6 芦丁含量测定

4．3 结果

4．3．1 正交试验直观分析结果

4．3．2 方差分析表

4．3．3 工艺筛选

4．4 工艺评价

4．4．1 工艺重现试验

4．4．2 工艺最小抑菌浓度测定

4．5 讨论

4．6 小结

5 加味桔梗汤对油酸致小鼠肺水肿的预防效果研究

5．1 材料

5．1．1 试验动物

5．1．2 药物和试剂

5．1．3 仪器与设备

5．2 方法

5．2．1 试验分组

5．2．2 动物模型的建立

5．3 检测、观察指标

5．3．1 肺系数测定

5．3．2 肺湿重与干重比和肺含湿量

5．3．3 肺组织病理学变化的观察

5．3．4 统计分析

5．4 结果

5．4．1 小鼠体征变化

5．4．2 检测项

5．4．3 病理组织学

5．5 讨论

5．6 小结

6 结论

参考文献

作者简历

致谢