红曲霉液态发酵法高产麦角固醇的研究

摘要

本试验通过筛选了四株红曲霉菌株Monascussp.ZZ、MonascusrubberZK、MonascuspurpurersGx、Monascussp.XM，得到高产麦角固醇的菌株-ZZ，每克菌体中含麦角固醇675.4μg，并对其进行麦角固醇的产量研究，得到在120h为菌株-ZZ的麦角固醇产量峰值，每克菌体含746.1μg麦角固醇。用HPLC和紫外测定进行方法比较，两者之间没有过大差异。 在对液体培养条件的研究上发现，接种量为10％时每克菌体含772.8μg麦角固醇，接种量越大生物量则越大；初始pH对菌体生物量有一定影响，但是麦角固醇含量较低；培养温度为30℃时每克菌体含747.6μg麦角固醇，温度过高会对麦角固醇的合成产生抑制；转速为220r/min时每克菌体中含775.1μg麦角固醇，转速过大会造成细胞破损从而生物量降低，转速过小又会对麦角固醇合成不利。 培养基的优化我们先进行了单因子的筛选，得到：乳糖3.0％时每克菌体中麦角固醇含量有1024.1μg，牛肉膏2.0％每克菌体中麦角固醇的含量有1351.1μg，MgSO41.00％时每克菌体中麦角固醇含量有957.9μg。再对所筛选出来的单因子进行选择，考虑麦角固醇产量和成本的问题，对最后确定的五个因素葡萄糖、酵母膏、(NH4)2SO4、MgSO4、KH2PO4进行回归分析，用D-最优先对ε进行分析，并采用二次饱和D-最优设计的方法进行试验设计和建立多项式回归模型，通过整理多项式得到最高指标时各个因素组合：葡萄糖3.7％、酵母膏3.0％、(NH4)2SO41.7％、MgSO40.5％、KH2PO41.6％，并对该组合进行验证，得到每克菌体中麦角固醇含量平均有2678.6μg，和多项式回归分析得到的最高指标接近。

目录

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声明

第一部分 前言

1.1红曲霉的分类和亚种

1.2红曲霉的生长和生长状态

1.3电镜下红曲霉的形态

1.4红曲霉生活史

1.5红曲霉的主要次生代谢产物

1.5.1橘霉素(citrinin)

1.5.2红曲色素

1.5.3莫纳可林K(monacolin-K)

1.5.4麦角固醇(ergosterol)

1.5.5酶类

1.5.6抑菌物质

1.6红曲霉的次生代谢产物--麦角固醇(ergosterol)

1.6.1麦角固醇的理化性质

1.6.2生物合成途径

1.6.3麦角固醇的含量测定

1.6.4麦角固醇提纯和分离纯化

1.6.5产麦角固醇菌株的发酵条件探讨

1.6.6麦角固醇作真菌生物量指示剂

1.6.7麦角固醇工业生产的国内外研究状况

1.6.8麦角固醇的市场前景

1.7立题依据

第二部分 试验部分

2.1麦角固醇高产菌株筛选

2.1.1材料与方法

2.1.2试验结果与分析

2.2麦角固醇测定方法比较

2.2.1材料与方法

2.2.2试验结果与分析

2.3培养条件优化

2.3.1材料与方法

2.3.2试验结果与分析

2.4培养基单因子优化

2.4.1材料与方法

2.4.2试验结果与分析

2.5正交试验

2.5.1材料与方法

2.5.2结果与分析

2.6最优回归设计法确定优化培养基配方

2.6.1前言

2.6.2材料与方法

2.6.3结果与分析

2.6.4小结

第三部分 结果与讨论

3.1结论

3.2讨论

3.2.1高产麦角固醇菌株的筛选

3.2.2不同液体种子培养基麦角固醇产量峰值不同

3.2.3对不同测定方法的讨论

3.2.4不同培养条件的优化讨论

3.2.5不同培养基组分的优化

致谢

参考文献

附录