卷柏中穗花杉双黄酮降糖作用机制研究

摘要

目的 研究卷柏中穗花杉双黄酮的降糖活性,探讨其治疗糖尿病的潜在机制。
　　方法 雄性ICR小鼠以高糖高脂饲料饲养诱发胰岛素抵抗, 8周后腹腔注射100mg/kg STZ建立糖尿病模型以20mg/kg、40mg/kg、60mg/kg穗花杉双黄酮连续给药8周,观察穗花杉双黄酮对糖尿病小鼠血糖、血脂水平、抗氧化水平及对胰岛素和胰高血糖素调节的影响,探讨卷柏穗花杉双黄酮治疗糖尿病的特点。检测穗花杉双黄酮对糖尿病小鼠血清中ALT、AST、BUN、CREA,肝脏指数和肾脏指数的影响,来评价穗花杉双黄酮对糖尿病小鼠肝肾功能的影响。采用光镜观察肝脏、胰腺病理形态,采用western blot法测定肝脏组织中PI3K的蛋白表达水平和肌肉组织中PI3K、Akt、pAkt的蛋白表达水平,免疫组化的方法检测GLUT4在骨骼肌组织的表达情况。并采用ELISA法测定肝脏中葡萄糖激酶(GK)、磷酸果糖激酶І(PFK)、 丙酮酸激酶(PK)、糖原合成酶激酶3(GSK-3)、葡萄糖-6-磷酸酶(G-6-Pase)的含量；糖异生关键酶,磷酸烯醇丙酮酸羧基酶(PEPCK)的活性,从而研究卷柏中穗花杉双黄酮降血糖作用特点及其作用机制。
　　结果 穗花杉双黄酮各剂量能降低糖尿病小鼠的空腹血糖(FBG)、胰高血糖素、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-c)、丙二醛(MDA)等,与模型组相比具有显著性差异(p<0.05、p<0.01)；能升高胰岛素、超氧化物歧化酶(SOD)；降低肝脏指数及丙氨酸转氨酶(ALT)、谷草氨酸(AST)水平,对肾脏指数及血尿素氮(BUN)、肌酐(CREA)无影响。HE染色结果显示,穗花杉双黄酮各剂量均能明显明显修复胰岛组织,改善肝脏中脂肪滴蓄积,恢复肝脏正常形态。Western-blot法结果显示：穗花杉双黄酮能不同程度增加肌肉组织组织pAkt蛋白表达,免疫组化结果显示穗花杉双黄酮增加骨骼肌组织GLUT4的表达。穗花杉双黄酮各剂量组能不同程度的增强葡萄糖激酶、6-磷酸果糖激酶1、丙酮酸激酶的活性(p<0.05、p<0.01),且能不同程度抑制糖原合成酶激酶、磷酸烯醇丙酮酸羧激酶、葡萄糖-6-磷酸酶的活性(p<0.05,p<0.01)。
　　结论 穗花杉双黄酮能够明显改善糖尿病小鼠糖脂代谢紊乱,能够促进胰岛素分泌,增强胰岛β细胞功能。同时,穗花杉双黄酮具有抗氧化作用。穗花杉双黄酮可能是通过激活PI3K/Akt信号通路,促进葡萄糖转运,调节糖代谢酶的活性,进而改善糖脂代谢紊乱,增加胰岛素敏感性发挥降糖作用。

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前言

实验1 穗花杉双黄酮对糖尿病小鼠糖脂代谢的影响

材料与方法

结果

实验2 卷柏中穗花杉双黄酮对糖尿病小鼠病理结构的影响

材料与方法

结果

实验3 穗花杉双黄酮对糖尿病小鼠胰岛素PI3K/Akt通路的影响

材料与方法

结果

实验4 穗花杉双黄酮对糖尿病小鼠肝脏葡萄糖代谢酶的影响

材料与方法

结果

讨论

结论

致谢

参考文献

附录

文献综述

在校期间论文论著和科研情况