不同类型精子发生障碍全基因组甲基化差异分析与重要功能基因的表达验证

摘要

目的:应用高密度基因芯片技术分析不同类型精子发生障碍的DNA损伤甲基化基因差异水平。
　　材料与方法:收集72份正常生育男性精液和不同类型男性不育症患者精液标本，提取精子DNA，行重亚硫酸盐转化，与Illumina HD450K InfiniumMethylation BeadChip芯片杂交，分析不同类型精子发生障碍的成年男性与健康有生育能力成年男性精子中的DNA甲基化水平差异情况。
　　结果:正常生育男性精子和少精症男性精子共687个基因存在DNA甲基化水平差异（Diff Score值50，P＜0.00001），甲基化程度升高基因568个，甲基化程度降低基因119个，正常生育男性精子和弱精症男性精子共2231个基因存在甲基化水平差异（DiffScore值50，P＜0.00001），甲基化程度升高基因1811个，甲基化程度降低基因420个;正常生育男性和不明原因不育男性精子共1550个基因存在甲基化水平差异（Diff Score值50，P＜0.00001），甲基化程度升高基因1154个，甲基化程度降低基因396个;对获得的差异基因进行聚类分析，结果提示:少精症男性精子DNA甲基化差异主要集中在细胞凋亡相关、细胞周期蛋白类相关基因，弱精症男性精子DNA甲基化差异多集中在离子通道和运输蛋白、细胞骨架和鞭毛运动等相关基因。不明原因不育男性精子DNA甲基化改变多集中在移植排斥、免疫相关、内分泌代谢相关基因。这些基因的DNA甲基化改变可能是导致不同类型精子生成障碍的原因之一。
　　结论:应用全基因组高密度甲基化芯片对不同类型精子生成障碍患者进行的系统研究表明:不同类型精子生成障碍患者的精子有不同的甲基化类型，这些DNA甲基化差异的发现，为进一步研究不同类型精子发生障碍的机理及其防治新方法的研究奠定了基础。

目录

声明

英文缩略索引

摘要

前言

第一部分 基于高密度芯片的不同类型精子发生障碍甲基化差异性分析

研究背景

材料与方法

结果

讨论

小结

参考文献

第二部分 不同类型精子发生障碍中MMEL1与TEKT5的转录分析

研究背景

材料和方法

结果

讨论

小结

参考文献

创新点

综述 辅助生殖技术中的精子发生障碍与DNA甲基化关系研究进展

致谢