卡非佐米联合米托坦用于治疗肾上腺皮质癌的体外研究

摘要

目的:通过观察卡非佐米单药、米托坦单药以及两者联合（混合或序贯给药）对人肾上腺皮质癌(ACC)细胞株H295R和SW13细胞的增殖抑制作用，明确卡非佐米能否增强米托坦对ACC细胞的抑制作用，确定最佳的联合给药方案，并探讨不同给药方式产生抗增殖效果差异的可能机制，为两药联合应用于ACC治疗提供实验依据。
　　方法:应用不同浓度的卡非佐米、米托坦及两者联合（混合或不同顺序的序贯给药）处理H295R和SW13细胞，MTT法检测其抑制率;流式细胞术检测卡非佐米单药、米托坦单药及两者联合给药对H295R和SW13细胞细胞周期的影响。
　　结果:1.H295R和SW13细胞对卡非佐米和米托坦的IC50值的探讨。试验中观察到卡非佐米单药可时间和剂量依赖性地抑制H295R和SW13细胞的增殖，48h的IC50值分别为11.62±0.21μmol/L和3.86±0.12μmol/L。不同细胞对米托坦的48h的IC50值分别为SW1362.37±3.21μmol/L，H295R18.42±1.21μmol/L。
　　2、卡非佐米与米托坦不同给药顺序对H295R和SW13细胞增殖的影响。在一定浓度条件下（IC50及2倍IC50浓度），对于H295R及SW1细胞，先给卡非佐米再给米托坦(CFZ→MTO)的给药方式抗增殖作用均优于先给米托坦再给卡非佐米（MTO→CFZ）组及卡非佐米和米托坦同期联合(CFZ+MTO)给药组(p＜0.05)。经计算其联合指数(CI)发现:在IC50及2倍IC50浓度条件下，CFZ→MTO和CFZ+MTO两种给药方式在H295R及SW13细胞CI均小于1，即存在药效的协同作用，CI值在H295R和SW13细胞分别为0.81±0.08，0.73±0.12和0.88±0.23，0.92±0.10。且CFZ→MTO的给药方式的协同作用较CFZ+MTO更加显著（p＜0.05）。而MTO→CFZ的给药方式在H295R和SW13细胞CI值均大于1，在H295R及SW13细胞CI分别1.65±0.26和1.31±0.19，表现为药物的拮抗作用，CI值与CFZ→MTO组和CFZ+MTO组相比，差异有统计学意义。
　　3、流式细胞术检测卡非佐米单药、米托坦单药以及两者联合给药(CFZ→MTO)对H295R及SW13细胞细胞周期的影响。于阴性对照相比，非佐米单药、米托坦单药以及联合(CFZ→MTO)给药干预对H295R和SW13细胞的细胞周期无影响，(p＞0.05）。
　　4、低浓度卡非佐米(1μmol/L)联合米托坦对H295R及SW13细胞的增殖的影响。对于H295R细胞，序贯给药组（CFZ1μmol/L→MTO50μmol/L）抑制率可达93±2.1％，较阳性对照组(MTO50μmol/L)81±3.1％显著提高，(p＜0.05);对于SW13细胞，序贯给药组(CFZ1μmol/L→MTO50μmol/L)抑制率可达72±4.3％，较阳性对照组(MTO50μmol/L)的54±5.6％明显提高(p＜0.05)。
　　结论:卡非佐米可以时间和浓度依赖性地抑制H295R及SW13细胞增殖，卡非佐米与米托坦联合应用时存在序贯依赖性地协同作用，先给予卡非佐米后给予米托坦的序贯方式协同作用最强，而且机制不是通过影响细胞周期来实现的。低浓度的卡非佐米可作为增敏剂提高米托坦对H295R及SW13细胞的抑制作用。

目录

声明

个人简历

摘要

前言

1．材料与设备

2．实验方法

结果

2．卡非佐米和米托坦联合(混合、序贯给药)对SW13及H295R细胞增殖的抑制作用及各组的CI值

3．卡非佐米、米托坦单药和贯序给药对H295R和SW13细胞周期的影响

4．卡非佐米1 μ mol／L联合不同浓度米托坦对H295R及SW13细胞的增殖抑制作用

讨论

1．米托坦与ACC治疗

2．蛋白酶体抑制剂对肿瘤的作用

3．卡非佐米联合米托坦序贯干预对ACC的作用

结论

参考文献

附录

综述 蛋白酶体抑制剂在实体瘤治疗的研究进展

致谢

攻读硕士学位期间发表的学术论文