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广西甜茶抗过敏成分的提取、纯化和结构鉴定

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第1章绪论

第2章广西甜茶抗过敏活性成分的提取、初纯化工艺研究

第3章甜茶抗过敏成分的纯化

第4章广西甜茶抗过敏成分体内实验

第5章甜茶抗过敏有效成分的结构初步鉴定

第6章 课题总结与研究展望

参考文献

致谢

攻读硕士期间参与的科研项目与学术论文发表情况

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摘要

广西甜茶是近年来发现的一个新植物品种,经鉴定为蔷薇科悬钩子属(Rubus suavissimus S.Lee.)。广西甜茶的研究集中在应用方面,对药理研究较少。本论文对广西甜茶中抗过敏成分进行了研究,以甜茶干叶为研究对象,以透明质酸酶抑制率来评价抗过敏能力,用样品中多酚含量表达纯度,采用溶剂提取、膜分离、大孔树脂层析分离及凝胶柱层析分离等一系列的分离纯化方法获得广西甜茶中的抗过敏活性成分,并用4个体内动物试验模型进一步论证广西甜茶提取物的抗过敏功能,通过I R、HPLC等对纯化后样品结构初步鉴定。得到如下结论: 确定了广西甜茶中抗过敏成分提取工艺。提取时间和溶液的pH是影响得率的两个主要因素。最佳条件为提取温度85℃,提取时间40min,pH值8.5,料液比1:20。在此条件下,甜茶多酚的得率3.91%。 确定了广西甜茶中抗过敏成分纯化工艺。通过静态吸附及动态吸附实验确定LSA-21大孔树脂用于初步纯化。在上柱浓度3mg/mL,液体的pH为4.8,流速1.2BV/h的条件下,通过透明质酸酶体外抑制试验,获得60%乙醇洗脱样品,纯度为42.35%,抗过敏活性为65.07%(C=10mg/mI)。用葡聚糖凝胶Sephdaex LH-20对样品1进一步纯化,二次纯化的50%丙酮洗脱样品纯度85.31%,抗过敏活性72.22%(C=2mg/mI)。动物实验表明:凝胶二次纯化的50%丙酮洗脱样品(5号样品)具有显著的抗过敏及消炎作用;体外模型中抑制率较低的样品1、2、4在小鼠的被动皮肤过敏反应中体现了显著的抗过敏能力(P-或-CH<,2>等官能团。用高效液相色谱分析发现,抗过敏成分的单体为没食子酸、鞣花酸以及葡萄糖。

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