小西葫芦黄化花叶病毒罗汉果分离株的抗血清制备及其田间寄主检测

摘要

罗汉果为葫芦科多年生藤本植物，是广西著名特产，具有重要的医疗和保健价值。长期以来，罗汉果一直受着病毒病的危害。本研究对小西葫芦黄化花叶病毒罗汉果分离株(ZYMV-LHG)进行了分离、繁殖、提纯、体外性质研究、抗血清的制备，并用抗血清检测田间植物的带毒情况。研究结果显示，用西葫芦可以从罗汉果病叶中分离到ZYMV-LHG，ZYMV-LHG在西葫芦上表现明脉、黄化、蕨叶症状；ZYMV-LHG的钝化温度为55℃，稀释限点为10-3，体外保毒期为6 d；自繁殖ZYMV-LHG的西葫芦病叶上提纯病毒；利用提纯的病毒免疫BALB/C小鼠制备抗血清，所获抗血清的效价为1:16 000；利用该抗血清检测罗汉果果园附近的作物及杂草，发现11科的14种植物表现阳性，其中包括葫芦科的丝瓜、南瓜、葫芦、茄科的辣椒、豆科的四季豆和杂草中堇菜科的堇菜、马鞭草科的大青、鸭跖草科的鸭跖草、菊科的野茼蒿、蓼科的齿果酸模、苋科的莲子草、车前草科的车前和酢浆草科的酢浆草。温室测定化学药剂对罗汉果病毒病的防治效果，先喷施化学药剂后摩擦接种病毒的处理中，以1.45％三氮唑核苷·烷醇·锌防治效果最好，其防效为58.99％，而5％二(辛基胺乙基)甘氨酸盐的防效最差，其防效为27.19％。在先摩擦接种病毒再喷施化学药剂的处理中，1.45％三氮唑核苷·烷醇·锌、5％盐酸吗啉胍和20％盐酸吗啉胍·乙铜的防效较好，其防效分别为52.82％、50.23％、47.17％，而5％二(辛基胺乙基)甘氨酸盐的防效最差，其防效为22.07％。但整体来说，化学药剂对罗汉果病毒病防治效果不是太理想。

目录

文摘

英文文摘

声明

1前言

1.1罗汉果的经济价值

1.2罗汉果的栽培

1.3罗汉果病害的发生

1.4罗汉果病毒病的研究概况

1.4.1罗汉果病毒病的病原鉴定

1.4.2罗汉果病毒病的其它相关研究

1.5尚存在的问题及本研究的内容

2材料与方法

2.1材料

2.2试剂

2.3方法

2.3.1 ZYMV-LHG的分离

2.3.2 ZYMV-LHG体外性质的测定

2.3.3 ZYMV-LHG的抗血清制备

2.3.4利用ZYMV-LHG抗血清检测田间不同植物的带毒情况

2.3.5化学药剂对罗汉果病毒病的防治试验

3结果与分析

3.1 ZYMV-LHG的分离

3.2 ZYMV-LHG的体外性质

3.2.1钝化温度

3.2.2稀释限点

3.2.3寄主体外存活期

3.3 ZYMV-LHG的抗血清制备

3.3.1 ZYMV-LHG的提取及浓度的计算

3.3.2 ZYMV-LHG抗血清效价的测定

3.3.3纯化后抗血清效价的测定

3.4利用ZYMV-LHG抗血清检测田间不同植物的带毒情况

3.4.1不同时期田间罗汉果病毒病发生情况调查

3.4.2田间罗汉果及其周边不同植物的带毒检测

3.5化学药剂对罗汉果病毒病的防治试验

3.5.1几种化学药剂对罗汉果病毒病的抑制率

3.5.2化学药剂对罗汉果病毒病的控制作用

4讨论与结论

4.1讨论

4.1.1 ZYMV-LHG的分离

4.1.2 ZYMV-LHG的体外性质

4.1.3 ZYMV-LHG抗血清的制备

4.1.4利用ZYMV-LHG抗血清检测田间不同植物的带毒情况

4.1.5罗汉果病毒病的化学药剂防治试验

4.2结论

4.2.1 ZYMV-LHG的分离

4.2.2 ZYMV-LHG的体外性质

4.2.3 ZYMV-LHG抗血清的制备

4.2.4利用ZYMV-LHG抗血清检测田间不同植物的带毒情况

4.2.5罗汉果病毒病的化学药剂防治试验

致谢

参考文献

附录