油茶蒲化学组分分析和总多酚的提取及抗氧化活性研究

摘要

以综合利用油茶蒲资源为出发点，采用国家相关标准方法测定了油茶蒲的主要化学组分含量;分离出其中的木质素、纤维素，并用红外光谱(FTIR)、核磁共振氢谱(1H-NMR)表征其结构;建立了油茶蒲总多酚的Folin-Ciocaileu测定法;采用正交实验和响应曲面法优化油茶蒲总多酚的提取工艺;用清除羟自由基、DPPH自由基、超氧阴离子自由基方法评价提取物的抗氧化活性。得到的主要结论如下:
　　(1)油茶蒲的主要化学组分含量分别为:水分12.02±0.01％，灰分17.65±0.04％，苯醇抽提物2.57±0.02％，综纤维素32.89±0.31％，纤维素17.69±0.23％,木质素45.87±0.11％（酸不溶木质素43.66±0.34％，酸溶木质素2.21±0.03％）。分离的磨木木质素(WML)和纤维素酶解木质素(CEL)都含有羰基、羟基、甲氧基等基团，其结构属于温带阔叶材木质素化学结构GS型，且木质素结构单元互相连接的方式有如下几种:β-β、β-O-4、β-1、β-5。
　　(2)以没食子酸为标样，总多酚含量测定的Folin-Ciocaileu法条件为:Folin-Ciocaileu显色剂用量0.8mL，质量分数10％的Na2CO3溶液用量6.0mL，显色温度40℃，反应时间2.0h，测定波长760nm。
　　(3)总多酚的超声波辅助和微波辅助提取法明显优于传统的溶剂回流法。溶剂回流法的最佳提取工艺为:以50％的乙醇溶液为提取溶剂，液料比20，提取温度70℃，提取80min，TP提取量为47.08±1.46mg·g-1。超声辅助提取的最优工艺为:以61.36％乙醇溶液为提取溶剂，液料比为13.70，提取温度65.21℃，超声功率为653.04w，提取45.77min，理论总多酚的最大提取量为50.36mg·g-1，实际TP提取量为52.78±1.05mg·g-1，相对误差为3.56％。微波辅助提取的最优工艺为:以36.24％乙醇溶液为提取剂，液料比为10，微波功率为638.65w，提取77.86s，理论总多酚的最大提取量为47.90mg·g-1，实际TP提取量为48.78±1.65mg·g-1，相对误差为1.8％。
　　(4)以抗坏血酸(Vc)和没食子酸丙酯(PG)做对照，评价样品微波提取浓缩液（ME）、微波提取-乙酸乙酯萃取物(MS)、超声提取浓缩液(UE)、超声提取-乙酸乙酯萃取物(US)的抗氧化能力。油茶蒲提取物及萃取物具有较强的清除羟自由基和DPPH自由基的能力，清除羟自由基能力由强到弱排序为:MS＞PG＞UE＞ME＞US＞Vc;清除DPPH自由基的能力由强到弱:PG＞ME＞US＞MS＞UE＞Vc;总多酚含量与清除羟自由基和DPPH自由基能力具有比较良好的正相关性;邻苯三酚自氧化法不适合用来评价油茶蒲总多酚清除超氧阴离子能力。

目录

声明

摘要

符号说明

第一章 绪论

1．1 油茶蒲概述

1．2 油茶蒲主要化学组分

1．2．1 木质素

1．2．2 综纤维素

1．3 植物多酚研究现状

1．3．1 植物多酚概述

1．3．2 植物多酚的提取技术

1．3．3 植物多酚的定量分析方法

1．3．4 植物多酚的抗氧化性研究

1．4 课题研究意义及内容

1．4．2 课题研究内容

第二章 油茶蒲主要化学组分分析

2．1．1 试剂与仪器

2．1．2 试验方法

2．2 结果与讨论

2．2．1 油茶蒲主要化学组分含量分析

2．2．2 油茶蒲三种主要化学组分结构分析

2．3 本章小结

第三章 油茶蒲总多酚的测定方法研究

3．1 材料与方法

3．1．1 试剂与仪器

3．1．2 试验方法

3．2 结果与讨论

3．2．1 测定波长的选择

3．2．2 Folin-Ciocaileu显色剂用量的选择

3．2．3 Na2CO3溶液体积的选择

3．2．4 显色反应温度的选择

3．2．5 显色反应时间的选择

3．2．6 显色稳定性实验

3．2．7 精密度实验

3．2．8 加标回收实验

3．3 本章小结

第四章 油茶蒲总多酚的提取工艺研究

4．1 乙醇回流提取总多酚工艺研究

4．1．1 材料与方法

4．1．2 结果与讨论

4．1．3 小结

4．2 响应面优化超声辅助提取油茶蒲总多酚工艺研究

4．2．1 材料与方法

4．2．2 结果与讨论

4．2．3 小结

4．3．1 材料与方法

4．3．2 结果与讨论

4．3．3 小结

4．4 本章小结

第五章 油茶蒲总多酚的抗氧化活性研究

5．1 材料与方法

5．1．1 试剂与仪器

5．1．2 样品的制备

5．1．3 试验方法

5．2 结果与分析

5．2．1 清除羟自由基能力评价

5．2．2 清除DPPH自由基能力评价

5．2．3 清除超氧阴离子自由基能力评价

5．3 本章小结

第六章 结论和展望

6．1 结论

6．2 展望

参考文献

致谢

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