人造血管移植物和多针头手术缝线的基础研究

摘要

自体血管移植物不能满足临床CABG的需要,同种异体和异种血管移植物因存在免疫排斥反应而不能满足临床的需要.人造血管的研究有多年历史,尽管至今尚不能为CABG提供理想的移植物,但人造血管的种种优点使它有可能成为最有前途的移植物.本项研究计划拟以tPA基因对自体EC进行改造,然后将该细胞种植于异种血管内壁,从而制成具有良好抗凝血活性的复合人造血管.本文拟先获取自体的大隐静脉EC,进行扩增培养后,摸索出理想的培养方法,然后对其进行tPA基因转染,寻找出快捷、实用的人造血管种子细胞获取途径,为下一步其它部分的研究做好准备.3.结论3.1通过各种物理或者化学的手段不能使人造血管获得长期的通畅,目前最为理想的方法是以EC对人造管道进行种植.而对于CABG手术病人,只有自体EC才能满足手术的需要,其它来源的内皮细胞由于不可避免地出现排斥反应而都不能满足CABG人造管道的需要.3.2自体EC不能随意取自机体的微血管或者大血管,较为合理的来源应该是CABG自身的是大隐静脉.为获得足以有效培养的EC来源,大隐静脉切取的最短长度应不少于8cm.3.3外界培养条件对EC的结构和功能有明显的影响,而这些结构和功能的变化可能影响EC的抗凝血活性,因此,为了获得满意的EC,培养的时间应该尽量缩短、传代的次数应该尽量减少、细胞培养的环境条件应该尽量接近生理状况下的条件.本实验中使用的方法是一种可靠的获取EC的方法.3.4为了增加人造血管的抗凝血活性,有必要对内皮细胞进行基因工程改造.而这种改造的前提是获得一个理想的在载体.本研究利用一种特殊的真核细胞表达载体pEGFP-C2构建了tPA/pEGFP-C2.3.5以tPA/pEGFP-C2载体转染培养的自体大隐静脉EC,获得了转染tPA基因的EC,经检测,这种细胞包含了tPA基因,并且能够在体外表达tPA.3.6自体大隐静脉内皮细胞转染tPA基因的成功,为现有方法进行基因工程人造血管的制作提供了理想的种子细胞.实验表明,该方法是一个简单快捷的转染内皮细胞的方法,具有很强的实用性,对人造血管制作的整个过程都有非常重要的意义.我们发明了一种多针头心脏手术缝线(POS),这种缝线设计与传统的手术缝线明显不同.该缝线由多个相连的针和线组成,每个针和两个相邻的线连接,每缝合一针可以引过两条线.为了证明POS在心脏手术中的实用性,我们对其基本特性以及在各种手术中使用的可能性进行了研究.3.结论POS是一种特殊的手术缝线,该缝线每个缝针和两条相邻的线相连,每穿一针,可以引过两条缝线.以这种缝线进行缝合,可以明显缩短手术时间,使某些心脏手术简化.在瓣膜置换、室间隔缺损修补等心脏手术中,其效果明显优于传统缝合方法和缝线.POS可广泛应用于其它心脏手术以及其它专业的手术操作中.POS是一个方便实用的手术缝线.然而,在具体应用中,要根据手术的具体要求,将POS和连续缝合、间断缝合进行比较,在效果确切的情况下,均可以考虑使用POS.

目录

缩略词表

第一章人造血管移植物的基础研究

第一节人造血管中内皮细胞的获取

1材料与方法

2结果

3讨论

4小结

参考文献

第二节人造血管种子细胞的建立

1材料与方法

2结果

3讨论

参考文献

第二章多针头手术缝线的基础研究

1材料与方法

2结果

3讨论

4结论

参考文献

文献综述

CABG中的自体血管移植物

CABG中同种异体血管移植物

心脏辨膜置换的缝合技术

附 件

致 谢