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子宫内膜异位症对窗口期在位子宫内膜6种差异蛋白及其基因表达的影响

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第一章 前 言

1.1 研究背景

1.2 研究目的

第二章 研究对象及实验材料

2.1 研究对象及分组

2.2 实验试剂

2.3 实验仪器

2.4 常用试剂配制

第三章 实验方法

3.1 荧光定量real-time PCR

3.2 Western 印迹

3.3免疫组化

第四章 实验结果

4.1 基因的mRNA表达检测

4.2 Western Blot方法检测SERPINB5蛋白表达

4.3 免疫组化方法检测SERPINB5蛋白表达

第五章 讨 论

5.1 子宫内膜异位症

5.2 主要实验技术

5.3遴选差异蛋白原则

5.4 6种蛋白及其基因的相关研究及结果讨论

5.5 研究展望

第六章 结 论

第七章 参考文献

第八章 发表综述

致谢

个人简历

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摘要

目的:本研究通过基因及蛋白组学技术对子宫内膜异位症并不孕患者和单纯输卵管性不孕症患者窗口期在位子宫内膜的6种差异蛋白质及其相关基因表达进行分析,探讨子宫内膜异位症对窗口期在位子宫内膜基因及蛋白表达的影响。
  方法:以15例腹腔镜证实的子宫内膜异位症合并不孕患者为病例组,以15例输卵管阻塞不孕且手术中证实不伴有子宫内膜异位症患者为对照组,分别刮取窗口期在位子宫内膜组织,遴选6种经2-DE凝胶电泳联合MALDITOF/TOF质谱分析得到的差异蛋白:Peroxiredoxin-3、14-3-3protein、Heat-shockproteinsB1、SERPINA1、Ataxin-10、SERPINB5。用荧光定量rt-PCR对mRNA表达进行研究;并用Western印迹法、免疫组化法检测组织中蛋白质的表达。
  结果:
  1、经荧光定量PCR方法成功对比了15例子宫内膜异位症并不孕症患者(实验组)与15例输卵管性不孕症患者(对照组)窗口期在位子宫内膜6种基因mRNA表达的变化。实验组SerpinB5mRNA表达较对照组下调,差异有显著统计学意义(PO.05)。
  2、经WesternBlot及免疫组化方法对SerpinB5的蛋白表达水平分析:实验组较对照组蛋白表达下调,差异有显著统计学意义(P  结论:
  1.SerpinB5、Peroxiredoxin-314-3-3proteinHeat-shockproteinsβ1、SerpinA1Ataxin-10各自mRNA在子宫内膜异位症合并不孕症及输卵管因素不孕症患者的窗口期在位子宫内膜组织上均有基础表达。
  2.SERPINB5在子宫内膜异位症并不孕症患者窗口期在位子宫内膜上表达下调,提示SERPINB5可能以特定的机制参与了子宫内膜异位症致不孕的发病过程。

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