厄贝沙坦对db/db小鼠心脏炎症反应和纤维化的影响及其机制的研究

摘要

目的：
　　探讨血管紧张素Ⅱ受体阻滞剂厄贝沙坦对2型糖尿病db/db小鼠心脏炎症反应和纤维化的保护作用及其心脏保护机制。
　　方法：
　　1.动物分组与处理:10周龄db/db小鼠36只，随机分成模型组，厄贝沙坦治疗组50mg/（kg·d）和阳性对照组[小白菊内酯(PTL)衍生物治疗组25mg/（kg·d）]，每组12只，而同窝出生的10周龄非糖尿病db/+小鼠12只，充当正常对照组。厄贝沙坦治疗组和PTL衍生物治疗组分别予厄贝沙坦、PTL衍生物溶于生理盐水中灌服。正常组，模型组小鼠灌服等容积生理盐水。连续干预16周。
　　2.一般情况及生化指标检测:记录心脏质量、体质量，测定空腹血糖、血甘油三酯、血总胆固醇含量。
　　3.左室心肌组织HE染色:观察各组小鼠左室心肌组织病理学变化。
　　4.Masson三色染色:观察各组心肌组织胶原纤维的含量。
　　5.Western blotting及NF-κB(P65)免疫组化:1）检测P-IκBα、IκBα的蛋白表达水平和P65的表达及入核激活情况;2）检测P-JAK2、JAK2、P-STAT3及STAT3的蛋白表达水平。
　　6.qPCR检测:检测各组心肌组织促炎细胞因子IL-6、TNF-α以及促纤维化细胞因子TGF-β1mRNA的表达水平。
　　结果：
　　1.一般情况及生化指标检测:与正常组相比，模型组、厄贝沙坦治疗组、PTL衍生物治疗组db/db小鼠均发生了肥胖、高血糖、高血脂。
　　2.左室心肌组织HE染色:与正常组相比，模型组小鼠心肌组织肌纤维排列紊乱，间质增多，并有局灶性炎症细胞浸润;厄贝沙坦治疗后有所改善，而PTL衍生物的治疗改善更明显。
　　3.Masson三色染色:与正常组比较，模型组心肌组织的细胞间质和血管周围胶原纤维明显增多，分布不均匀，排列紊乱，并呈网状连接;厄贝沙坦治疗后，胶原纤维数量有所减少，效果介于两者之间;而PTL衍生物治疗后胶原纤维明显减少。
　　4.Western blotting及NF-κB(P65)免疫组化:1）与正常组比较，模型组心肌组织的P-IκBα蛋白水平升高、IκBα蛋白水平降低，P-IκBα/IκBα升高;NF-κB(P65)活性增强，入核增加;2）与正常组相比，模型组小鼠心肌组织的P-JAK2，P-STAT3蛋白表达明显上调;以上改变经厄贝沙坦治疗后有所减轻，而PTL衍生物的治疗改善更明显。四组的JAK2，STAT3蛋白表达均无明显变化。
　　5.qPCR检测:与正常组比较，模型组心肌组织的IL-6、TNF-α以及TGF-β1的mRNA的表达水平升高，厄贝沙坦治疗后抑制了其表达水平，而PTL衍生物治疗后抑制明显。
　　结论：
　　1.2型糖尿病db/db小鼠心肌组织NF-κB及JAK2/STAT3信号通路被激活，诱导了IL-6、TNF-α和TGF-β1mRNA的表达，促进心脏炎症反应和纤维化。
　　2.厄贝沙坦的长期治疗降低了IL-6和TNF-αmRNA的表达，改善了2型糖尿病db/db小鼠心脏炎症反应，其机制可能与抑制心脏血管紧张素Ⅱ的作用和NF-κB信号通路有关。
　　3.厄贝沙坦的长期治疗下调了心肌组织JAK2/STAT3信号通路，抑制了TGF-β1的mRNA的表达，改善了2型糖尿病db/db小鼠心脏纤维化，其机制可能与心脏NF-κB信号通路的抑制有关。
　　4.厄贝沙坦的早期干预可能是临床上治疗糖尿病心肌病的一种有价值的辅助药物，尤其是糖尿病伴高血压患者。

目录

摘要

前言

第一章 厄贝沙坦对db／db小鼠心脏炎症反应的影响及其作用机制

1．材料与方法

2．结果

4．结论

第二章 厄贝沙坦对db／db小鼠心脏纤维化的影响及其作用机制

1．材料与方法

2．结果

3．讨论

4．结论

全文总结

参考文献

中英文缩略词对照表

攻读学位期间成果

致谢

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