胰岛素在脓毒症诱导急性肾损伤中改善线粒体功能障碍机制的研究

摘要

目的：
　　1.探讨胰岛素改善脓毒症诱导急性肾损伤和线粒体功能障碍的效应。
　　2.探讨胰岛素改善线粒体功能障碍的机制。
　　3.探讨胰岛素改善肾脏氧化应激的机制。
　　4.验证胰岛素在脓毒症诱导急性肾损伤中通过上调解耦联蛋白UCP2改善线粒体功能障碍。
　　方法：
　　经盲肠结扎穿孔(CLP)建立脓毒症模型，大鼠随机分为正常组、CLP组、假手术组、CLP+胰岛素组（胰岛素组）、CLP+胰岛素+京尼平组（京尼平组）。
　　1.比较前四组肾功能、组织病理、线粒体功能和结构。
　　2.比较前四组炎症因子、氧化应激和酪氨酸激酶/磷酸酶信号通路。
　　3.比较前四组抗氧化酶/蛋白、UCP2、线粒体自噬和生物发生。
　　4.比较后两组UCP2和氧化应激水平、线粒体功能和结构、肾功能、组织病理。
　　统计学分析
　　用SPSS17.0和单因素方差分析统计各组计量资料，P＜0.05表示差异有统计学意义。
　　结果：
　　第一部分
　　1.CLP组12/24h血清NGAL和24hCRE、BUN水平显著升高，胰岛素治疗后显著降低。
　　2.胰岛素减轻CLP导致的肾脏病理损伤。
　　3.CLP12/24h显著降低肾脏ATP、线粒体膜电位和升高线粒体ROS水平，胰岛素治疗24h后显著改善。
　　4.CLP组12/24h凋亡率、caspase-9活性和24h转录水平显著升高，胰岛素治疗后显著下降。
　　5.胰岛素减轻CLP导致的线粒体损伤。
　　第二部分
　　1.CLP组12/24h血清TNF-α、IL-1β和24h肾脏TNF-α、IL-1β水平显著升高，经胰岛素治疗后显著降低。
　　2.CLP组12/24h肾脏ROS、iNOS、NO、MDA水平显著升高，胰岛素治疗后显著下降。
　　3.CLP和胰岛素组酪氨酸磷酸酶表达水平无差异，均显著低于正常组。
　　第三部分
　　1.CLP不上调SOD转录水平，胰岛素组24hSOD2转录水平显著高于正常组和CLP组。CLP组12/24hSOD活力显著降低，胰岛素治疗24h后显著升高。
　　2.CLP组GSH表达显著降低;胰岛素不上调GSS转录水平，24hGSH水平显著低于正常组。
　　3.CLP组和胰岛素组24hUCP2转录水平显著升高;胰岛素组12/24h和CLP组12hUCP2表达水平显著高于正常组，且在24h胰岛素组显著高于CLP组。
　　4.CLP组24h线粒体自噬相关蛋白表达显著高于正常组和胰岛素组。各组线粒体生物发生相关蛋白转录水平无差异。
　　第四部分
　　1.京尼平抑制胰岛素上调UCP2和SOD2。
　　2.京尼平组肾损伤、氧化应激和线粒体功能障碍较胰岛素组严重。
　　结论：
　　1.胰岛素可改善脓毒症诱导急性肾损伤和线粒体功能障碍，降低炎症反应和氧化应激，上调UCP2和SOD2。
　　2.京尼平可抑制胰岛素上调UCP2和SOD2、降低氧化应激、保护线粒体和改善肾损伤。
　　3.上调UCP2可能是胰岛素在脓毒症诱导急性肾损伤中改善线粒体功能障碍的主要机制。

目录

摘要

前言

第一部分 胰岛素对脓毒症诱导急性肾损伤和肾脏线粒体功能障碍的治疗效应

材料与方法

结果

讨论

第二部分 胰岛素改善脓毒症诱导肾脏线粒体功能障碍的机制探讨

材料与方法

结果

讨论

第三部分 胰岛素调节脓毒症诱导肾脏组织氧化应激的机制探讨

材料与方法

结果

讨论

第四部分 胰岛素在脓毒症诱导急性肾损伤中改善线粒体功能障碍的机制验证

材料与方法

结果

讨论

本研究结论总结

参考文献

综述

附录

在读博士期间的发表论文

中英文缩写

致谢

声明