β-兴奋剂类兽药多残留系统快速高效检测方法的研究

摘要

动物性食品中兽药残留是近几年来国际社会开始研究的公共卫生问题之一世界各国加强了对国际贸易动物性食品中兽药残留的检测,而开展饲料及饲料添加剂中兽药残留的检测是从源头进行控制的有效手段。
　　β-兴奋剂是一类人工合成药物,主要用于防治人、兽支气管哮喘和支气管痉挛,在饲料中添加β-兴奋剂具有营养再分配作用,可以明显提高动物瘦肉率。
　　建立快速高效的检测方法是今后安全检测技术发展的一个重点,同时测定多种成分是实现系统、快速、高效检测的重要手段之一。
　　国家“十五”计划的“食品安全关键技术研究”项目提出要建立农药与兽药多残留检测方法与快速检测技术,其中兽药要求β-兴奋剂在10种以上。目前,国内、外均没有制订出同时测定10种以上β-兴奋剂兽药多残留检测方法。因此,迫切需要研制β-兴奋剂类兽药多残留系统快速、高效检测方法,而本课题正是针对这一问题开展相关的研究。
　　本课题建立了用高效液相色谱法同时测定10种β-兴奋剂兽药多残留检测方法,方法对前处理实验条件(应用了较先进的SPE技术)和色谱条件进行优化获得最佳实验条件,在该实验条件下,10种β-兴奋剂得到良好的分离,10种β-兴奋剂的最低检测限在0.010mg/kg至0.049mg/kg范围,回收率在60.0%至82.9%之间,方法应用于实际样品测定。
　　本文又建立了用液质联用色谱法测定饲料中5种β-兴奋剂含量的方法,开展了对前处理实验条件和色谱条件进行优化选择实验,在优化的实验条件下,5种β-兴奋剂得到良好的分离,最低检测限在12.0ng/kg至120ng/kg范围,回收率在79.0%至91.1%之间,方法应用于实际样品测定。
　　本文进一步将气质联用色谱法应用于测定5种β-兴奋剂同时测定的研究,样品提取后,不经衍生直接上机,5种β-兴奋剂的方法最低检测限在4.5ng/kg至45ng/kg范围之间,回收率在75.9%至86.7%之间。并将HPLC/MS与GC/MS进行比较。
　　以上所建立的三种方法的精密度和准确度均达到全国疾病预防控制系统工作规范中兽药残留分析技术要求,检测低限达到国内限量标准要求。方法均用于日常样品测定。所建立的三种方法在国内外鲜有报道。
　　当发生公共卫生应急事件时,可先用高效液相色谱法进行快速大量的检测,结合液质联用或气质联用的方法,报出准确的结果。与目前单一测定每种β-兴奋剂方法比较,本研究所建立的方法达到了缩短检验周期、降低检测成本的目的。

目录

中文摘要

Abstract

第一章 前言

1 测定β-兴奋剂残留量的意义

2 β-兴奋剂简介

2.1 β-兴奋剂的基本结构

2.2 β-兴奋剂作用机理

3 β-兴奋剂检测国内外研究进展

3.1 样品采集

3.2 样品前处理

3.3 β-兴奋剂的主要分析方法

4 国内已取得的主要科技成果

参考文献

第二章 用高效液相色谱法测定10种β-兴奋剂

1 实验内容

1.1 实验仪器

1.2 试剂和材料

1.3 标准溶液的配制

1.4 实验方法

2 前处理优化实验条件

2.1 游离β-兴奋剂

2.2 抽提

2.3 固相萃取净化

3 色谱条件优化

3.1 色谱柱的选择

3.2 流动相及其pH值的选择

3.3 柱温的选择

3.4 β-兴奋剂的紫外可见光光谱图及色谱图

3.5 梯度选择

3.6 种β-兴奋剂色谱分离

5 实验结果

5.1 样品和样品加标试验

5.2 方法的标准曲线

5.3 最低检测限

5.4 方法的回收率和精密度

6 实测样品

7 小结

参考文献

第三章 用液质联用仪测定多种β-兴奋剂

1 实验仪器与试剂

1.1 实验仪器

1.2 试剂和材料

1.3 标准溶液的配制

2 实验方法

2.1 样品前处理方法

2.2 流动相系统的选择

3 色谱条件

3.1 色谱条件

3.2 质谱条件

4 结果与讨论

4.1 标准质谱图

4.2 6种β-兴奋剂图谱

4.3 方法试验

4.4 质谱方法的标准曲线

4.5 质谱方法最小检测限

4.6 质谱方法的回收率和精密度

4.7 实测样品

4.8 色谱方法与质谱方法对5种β-兴奋剂检测的灵敏度比较

4.9 小结

参考文献

第四章 用气质联用仪测定多种β-兴奋剂

1 实验仪器与试剂

1.1 实验仪器

1.2 试剂和材料

1.3 标准溶液的配制

2 实验方法

2.1 样品前处理方法

2.2 用BSTFA衍生

2.3 用三氟醋酸酐衍生

2.4 直接上机

3 色质谱条件

3.1 色谱条件

3.2 质谱条件

4 结果与讨论

4.1 用BSTFA衍生法进行GC／MS检测

4.2 用三氟醋酸酐衍生法进行GC／MS检测

4.3 不经衍生化进行GC／MS分析

5 实测样品

6 衍生法有待进一步完善

7 小结

参考文献

第五章 总结

参考文献

附录一

致谢