鸡蛋内胆汁酸沉积的调控及其对子代生长与肌纤维发育的影响

摘要

畜禽的产肉潜力与其肌纤维的数量密切相关，而在动物胚胎发育后期和动物出生后，肌纤维数量基本已固定。禽类作为卵生动物，其在生长初期的生长和发育完全依赖于蛋中的营养物质，因此其肌肉的发育很大程度上也受到了种蛋内成分的影响。本实验室前期的研究表明，蛋内胆汁酸的含量对鸡胚胎期的骨骼肌发育有着重要影响。为了探讨蛋内胆汁酸营养调控的方法，开发用于肉种鸡的子代肉鸡生长调节剂，本研究分别给种鸡饲喂鹅脱氧胆酸（chenodexycholic acid,CDCA）及油脂固醇类物质，探讨了它们对蛋内胆汁酸沉积的影响，并进一步研究了子代鸡肌肉发育情况：
　　1、试验选用14周龄体况良好的开产矮脚黄种鸡80只，随机分成5个组，每组16个重复，每个重复1只鸡。对照组使用基础饲粮，处理组Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ是在基础日粮中分别含有10 mg/kg、50 mg/kg、100 mg/kg和500 mg/kg的CDCA，试验期4周。在试验3周后给各组种鸡进行人工受精，并开始每天收集种蛋，收集1周后将种蛋按照种鸡分组进行孵化，孵化期为21 d。出雏后的子代鸡根据种鸡分组情况分为5组育雏，4周龄时在原分组的基础上公母分开饲养，子代公鸡每组6个重复，每个重复6只鸡；子代母鸡每组6个重复，每个重复4只鸡。自由采食和饮水，子代饲养周期为12周。结果表明：在饲粮中添加CDCA对母鸡体重、蛋品质及产蛋率无显著影响。与对照组相比，在饲粮中添加100 mg/kg CDCA能够显著增加种鸡血清中甘油三酯（TG）的含量（P<0.05），在饲粮中添加10 mg/kg和100 mg/kgCDCA能够显著降低种鸡血清中极低密度脂蛋白（VLDL）含量（P<0.05）；但对血清中高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、胆固醇（TC）和总胆汁酸（TBA）含量无显著影响。在饲粮中添加100 mg/kg CDCA能够显著降低试验第14、23和28天蛋内总胆汁酸的含量（P<0.05），显著增加28天蛋内TC和低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）含量（P<0.05），而对蛋内TG含量无显著影响。与对照组相比，在饲粮中添加50 mg/kg的CDCA能够显著增加子代鸡腓肠肌纤维密度（P<0.05）。对于子代母鸡，在饲粮中添加100 mg/kg和500 mg/kg CDCA显著降低平均日增重，而添加50 mg/kg和100 mg/kg CDCA能够显著降低腓肠肌中乳酸脱氢酶（LDH）的活性，添加500 mg/kg的CDCA能够显著降低腓肠肌琥珀酸脱氢酶（SDH）活性（P<0.05）；对于子代公鸡，在饲粮中添加10 mg/kg和100 mg/kg CDCA能显著降低腓肠肌总蛋白沉积量，添加500 mg/kg的CDCA能显著降低腓肠肌LDH活性（P<0.05）。
　　2、根据前期试验的结果发现，CDCA直接饲喂种鸡四周不能增加蛋内胆汁酸的沉积，反而减少了蛋内胆汁酸的含量。为了筛选能够有效促进蛋内胆汁酸含量沉积的饲料添加剂，本研究选取了几种能够调控胆汁酸分泌的油脂固醇类物质作为种鸡日粮的添加剂饲喂种鸡，通过分析种鸡肝脏胆固醇代谢相关基因的变化及蛋内胆汁酸沉积情况，筛选出了能够显著增加蛋内胆汁酸含量的添加剂。结果表明，在日粮中添加植物甾醇酯能够显著增加蛋内胆汁酸的含量，同时还能显著促进母体血清胆汁酸的水平以及母体肝脏CYP7A1 mRNA的表达，并显著抑制LXR和LRH-1 mRNA的表达
　　（P<0.05）。这些结果提示蛋内胆汁酸的增加可能是通过提高母体胆汁酸水平来实现的。
　　3、为了进一步验证蛋内胆汁酸增加对子代肌肉发育的影响，本试验收集了在日粮中添加植物甾醇酯饲喂的种鸡所产种蛋进行孵化，检测子代鸡后续肌肉发育相关指标。结果表明，与对照组相比，处理组能够显著增加子代49日龄体重和平均日增重，并能够显著增加子代母鸡肌纤维密度；从血清指标结果显示，与对照组相比子代公鸡血清甘油三酯和葡萄糖水平显著升高，子代母鸡血清IGF-1和胰岛素水平显著升高，但血清甘油三酯水平显著下降。分子水平上，Western blot检测发现1日龄和49日龄子代母鸡腓肠肌Decorin、FXR的蛋白表达量显著升高，同时49日龄子代母鸡腓肠肌MyoD、Myogenin和TGR5的蛋白表达量显著升高（P<0.05）。
　　综上所述，通过给肉种鸡饲喂植物甾醇酯，可以促进种鸡肝脏胆汁酸的合成，并提高胆汁酸在蛋内的沉积。蛋内胆汁酸水平升高可以显著促进子代母鸡肌肉的生长发育。

目录

封面

声明

中文摘要

英文摘要

英 文 缩 写 词 表

目录

1前言

1.1研究背景

1.1.1骨骼肌发育的过程

1.1.2蛋内营养对禽类胚胎期骨骼肌发育的影响

1.1.3胆汁酸对动物生长的作用

1.1.4胆汁酸合成代谢的途径

1.1.5胆汁酸合成的调控

1.1.6植物甾醇酯的生物学作用

1.2研究目的与意义

2材料与方法

2.1试验材料

2.1.1试验动物

2.1.2饲粮组成及营养水平

2.1.3主要仪器设备

2.1.4试验用品及耗材

2.2 试验方法

2.2.1试验的分组及处理

2.2.2测定指标及方法

2.2.3数据统计与分析

3 结果与分析

3.1日粮中添加CDCA对种鸡生产性能及脂代谢的影响

3.1.1日粮中添加CDCA对种鸡体重、产蛋率及蛋品质的影响

3.1.2日粮中添加CDCA对种鸡产蛋蛋品质的影响

3.1.3日粮中添加CDCA对种鸡血清脂代谢相关指标的影响

3.1.4日粮中添加CDCA对蛋内沉积的影响

3.2日粮中添加CDCA对子代生产性能及肌肉发育的影响

3.2.1日粮中添加CDCA对子代初生重、平均日增重、料重比的影响

3.2.2日粮中添加CDCA对子代脏器指数的影响

3.2.3日粮中添加CDCA对子代腓肠肌肌纤维密度、总蛋白的影响

3.2.4日粮中添加CDCA对子代腓肠肌肌纤维密度的影响

3.2.5日粮中添加CDCA对子腓肠肌SDH和LDH活性的影响

3.3调控胆汁酸分泌的功能性添加剂对种鸡蛋内胆汁酸代谢的影响

3.3.1调控胆汁酸分泌功能性添加剂对鸡蛋内胆汁酸沉积的影响

3.3.2调控胆汁酸分泌功能性添加剂对鸡血清胆汁酸及脂代谢指标的影响

3.3.3植物甾醇酯对种鸡肝脏相关基因mRNA表达影响

3.4日粮中添加植物甾醇酯对种鸡子代生产性能及肌纤维发育的影响

3.4.1日粮中添加植物甾醇酯对子代体重和平均日增重的影响

3.4.2日粮中添加植物甾醇酯对子代血清脂代谢相关指标及激素含量的影响

3.4.3日粮中添加植物甾醇酯对子代腓肠肌纤维密度的的影响

3.4.4日粮中添加植物甾醇酯对子代1日龄肌纤维发育相关基因蛋白表达的影响

3.4.5日粮中添加植物甾醇酯对子代49日龄肌纤维发育相关基因蛋白表达的影响

4 讨论

4.1种鸡日粮组成对蛋内物质沉积的影响及其机制

4.2胆汁酸合成及分泌的调节

4.3蛋内胆汁酸含量对子代生长的影响

4.3.1蛋内胆汁酸含量对子代生产性能和腓肠肌肌纤维密度的影响

4.3.2蛋内胆汁酸含量对子代腓肠肌能量代谢酶活性影响

4.3.3蛋内胆汁酸含量对子代腓肠肌生肌相关蛋白表达及血清激素的的影响

5 结论

致谢

参考文献

附录