鸡内耳发育的基因调控与干预

摘要

生物体正是依赖于它自身基因表达在时间上和空间上的调控，才得以正常分化、发育、繁殖和调节代谢。在脊椎动物的内耳发育中，细胞分化命运的决定有赖于复杂的基因调节通路，此调节通路涉及Wnt家族。Axin2是正规的Wnt调节通路中一个副调节因子，它通过促进β-catenin的降解，抑制信号的传导。我们发现了一个鸡的等位基因cAxin2，于HH-14+期，它初始表达在发育内耳的耳杯中，并在内耳的形成及进一步耳囊的分化过程中显示了一个动态的表达方式。在这项研究中，我们通过应用活体电穿孔技术操控基因在耳囊中表达的方法，研究了用RNA interference(RNAi)诱导靶基因沉默的可行性。我们的结果显示，应用增强的绿荧光蛋白、cAxin2和短发夹RNA构建质粒通过活体电穿孔技术转染后，在耳囊中，可以看到很强的绿荧光信号。进一步的研究发现，用原位杂交技术检测基因cAxin2、Paired Box2(cPax2)及Bone Morphogenetic Protein 4(cBMP4)在转染后耳囊中的表达，显示cAxin2的表达被短发夹RNA抑制、cPax2被下调而cBMP4被上调、并能看到一个异常增大的耳囊。结果提示，cAxin2是一个内耳发育过程中非常重要的调控基因。

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