AG490调控人宫颈癌裸鼠移植瘤Survivin表达与STAT3信号通路的机制

摘要

目的：探讨AG490对人宫颈癌裸鼠移植瘤生长、凋亡的影响以及调控Survivin表达与Stat3信号转导通路的关系。 方法：建立宫颈癌裸鼠移植瘤模型并分组，裸鼠背侧近右后肢处皮下接种人宫颈癌hela细胞，30 d后分4组治疗，每组8只动物。对照组，腹腔注射无菌生理盐水；DDP组腹腔注射5㎎/㎏；AG490组腹腔注射8㎎/㎏；DDP+AG490组腹腔注射DDP5㎎/㎏+AG4908㎎/㎏；上述药物均每3 d注射1次，共注射4次，于停药次日处死裸鼠。治疗期间观察并记录各组裸鼠皮下移植瘤的生长情况，计算肿瘤体积、肿瘤生长抑制率，绘制肿瘤生长曲线，观察用药后裸鼠体重变化。免疫组化、Western blot分别检测移植瘤P-STAT3、Survivin表达，流式细胞技术检测细胞凋亡。 结果：(1)各治疗组治疗后肿瘤体积和抑瘤率与对照组相比差异均具有统计学意义(P<0.05)；与DDP及AG490组比较，DDP+AG490联合用药组肿瘤体积明显减小(P<0.05)，抑瘤率明显增高(P<0.05)； AG490组与对照组比较体重变化无显著性差异(P=0.19)。(2)DDP组、AG490组和联合用药组凋亡率分别是52.1±1.3％、39.5±0.4％、66.7±1.8％，各组与对照组10.2±2.4％相比均有显著性差异(P<0.05)。(3)移植瘤HE染色肿瘤细胞平均坏死率为：对照组21.8±9.0％、AG490组39.4±11.3％、DDP组40.8±7.3％、DDP+AG490组61.9±9.6％，各组与对照组差异有统计学显著意义(P<0.05)，DDP+AG490组与AG490组、DDP组差异有统计学意义(P<0.05)。(4)免疫组化结果各组阳性率依次为：P-STAT3；对照组92.5％；DDP组64％；AG490组55％；DDP+AG490组40.9％1 Survivin：对照组90.4％；DDP组53.9％； AG490组52.1％；DDP+AG490组36.8％；可见在对照组中P-STAT3、survivin均为高表达，用药后表达有下降。 结论：1.AG490与DDP单独及联合应用能抑制宫颈癌移植瘤生长，促进宫颈癌细胞凋亡，同时使宫颈癌细胞P-STAT3、Survivin表达与活性明显下降。2.联合应用AG490与DDP，可以起协同作用。3.AG490可以增强DDP的药物敏感性并且减轻药物副作用，JAK激酶抑制剂AG490与DDP联合应用可能为治疗宫颈癌提供了新的理论基础。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：缩略语表

声明

前言

1 JAKs／STATs信号转导通路的研究现况

1.1 STAT3的分子生物学特性

1.2 STAT3与肿瘤的关系

1.3 AG490与肿瘤治疗

2 Survivin与肿瘤的关系

2.1 Survivin的分子生物学特性

2.2 SLirVivin与肿瘤的研究进展

2.3 Survivin与妇科肿瘤的关系

3顺铂在肿瘤治疗中的作用

材料与方法

1实验材料

1.1宫颈癌hela细胞培莠

1.2实验动物

1.3药品与主要试剂

1.4主要仪器设备

1.5主要工作液

2实验方法

2.1宫颈癌裸鼠皮下移植瘤模型的建立

2.2实验分组

1.4流式细胞术分析

1.5病理组织学检查(HE染色)

1.6免疫组化法

1.7统计学处理

结 果

1裸鼠肿瘤体积的变化

2抑瘤率的比较

3体内实验毒副作用观察

4流式细胞术分析

5移植瘤苏木精-伊红染色结果

6免疫组化结果显示

讨 论

1 AG490联合顺铂或单用对宫颈癌裸鼠移植瘤生长及凋亡的影响

2 AG490联合顺铂或单用抑制了裸鼠移植瘤P-STAT3和Survivin的表达

结论

参考文献

攻读硕士期间发表论文

致谢

附录：实验照片