香菇多糖对急性髓系白血病患者树突状细胞的成熟和功能影响的体内外研究

摘要

目的：通过体内外试验研究香菇多糖(lentinan，LNT)对急性髓系白血病(AML)患者树突状细胞(DC)的促成熟及功能调节的机制，进一步阐明香菇多糖的免疫学活性，并探索白血病免疫治疗的新途径。
　　 方法：体外试验用Ficoll密度梯度离心法分离急性髓系白血病完全缓解期(AML-CR)患者的骨髓单个核细胞(BMNC)用含重组人粒-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)1000U/ml和重组人白细胞介素4(rhIL-4)500U/ml的RPMI-1640完全培养基在37℃5％CO2孵箱中培养至第7天。阳性对照组加常规量的脂多糖(LPS)，实验组分别用LNT1ug、3ug、5ug刺激DC，阴性对照组加相同体积的培养液，培养48小时后；经形态学观察(倒置显微镜、Wright-Giemsa染色)，免疫学(CD80、CD83、CD86、CD1a、HLA-DR)的鉴定，ELISA双抗体夹心法检测DCs上清液白细胞介素12(IL-12)的水平。体内试验用免疫磁珠法(MACS)分离AML-CR患者经LNT治疗前、后的外周血单个核细胞(PBMNC)的DCs；ELISA双抗体夹心法检测DCs上清液IL-12的水平。
　　 结果：体外试验，高剂量组LNT作用的DC呈典型形态；能够提高DC表面分子CD80、CD83、CD86、CD1a及HLA-DR的表达(P＜0.05)；DC分泌IL-12较阴性对照组显著增高(P＜0.05)，且呈LNT浓度依赖性。体内试验，经LNT治疗后分离纯化的DC分泌IL-12的量与治疗前比较有明显差异(P＜0.05)，与体外试验相一致。
　　 结论：LNT在体内、外均能促进AML患者DC的成熟和功能的增强而间接发挥抗白血病作用。

目录

文摘

英文文摘

声明

前言

材料与方法

1.研究对象

2.实验分组

3.观察指标

4.所用药物

5.试剂、仪器与材料

5.1试剂

5.2仪器与材料

6.实验方法

6.1骨髓和外周血单个核细胞的分离

6.2 DC的培养与成熟诱导

6.3 DC的形态观察及免疫表型检测

6.4分离纯化PBMNC中的DC

6.5细胞因子的检测

7.统计学方法

8.技术路线图

结果

1.细胞的增殖情况及形态观察

2.DC表面分子的检测

3.香菇多糖能够促进DC分泌IL-12

讨论

结论

参考文献

硕士期间研究成果

致谢

附录：缩略词表