DnaseⅠ活性受损在类风湿关节炎中潜在的致病作用

摘要

目的：中性粒细胞胞外网状陷阱(NETs)形成异常与类风湿关节炎(RA)发病机制相关，而脱氧核糖核酸酶I(DNase I)在体内具有清除NETs的作用。本研究旨在探讨DNase I在RA中潜在的致病作用。
　　方法：①收集83例RA患者和60名健康对照者血清，采用辐射状酶扩散法测定血清DNase I活性，并记录RA患者同时期抽血的临床指标，分析血清DNase I活性与临床指标间的相关性；②抽取27例RA患者和38例其他炎性关节炎患者滑液(SF)，采用辐射状酶扩散法测定SF DNase I活性，Pico Green试剂盒测定SF游离DNA(cfDNA)水平，并记录RA患者同时期抽取关节液的临床指标，分析SF cfDNA水平与RA患者临床指标间的相关性。组间比较应用独立样本t检验和Mann-Whitney U检验，两变量之间的相关性应用Pearson相关和Spearman等级相关分析。
　　结果：⑴RA组血清DNase I活性显著低于健康对照组[0.2913(0.2029,0.4064)U/ml vs0.3980(0.2864,0.5484)U/ml。P<0.001]，血清DNase I活性与红细胞沉降率(ESR)(r=-0.2862。P=0.0122)、中性粒细胞计数(r=-0.287。P=0.011)和C反应蛋白(CRP)(r=-0.2790。P=0.0184)呈负相关，而与病程、关节压痛数(TJC)、关节肿胀数(SJC)、类风湿因子(RF)、28个关节疾病活动性评分(DAS28)、抗环瓜氨酸多肽(CCP)抗体、X线分期无关。⑵SFDNase I活性在RA组、强直性脊柱炎(AS)组和痛风性关节炎(GA)组中几乎都是阴性的。RA组患者SF cfDNA水平明显高于骨性关节炎(OA)组患者[40.00(12.47,163.22)ug/ml vs9.27(4.62,17.58)ug/ml。P=0.002]，与AS组[36.80(4.84,84.82)ug/ml。P=0.428]和GA组[156.72(89.81,257.11)ug/ml。P=0.132]无显著性差异；RA患者SF cfDNA水平与病程、ESR、CRP、DAS28、中性粒细胞计数、RF-IgG、RF-IgA、RF-IgM、抗CCP抗体及X线分期无关，而炎性关节炎患者SF cfDNA水平与ESR(r=0.4106。P=0.0116)和CRP(r=0.5747。P=0.0002)呈显著正相关。
　　结论：①与健康对照组相比，RA患者血清DNaseI活性显著降低，且与系统炎症指标相关，说明疾病活动度高的患者血清DNase I活性是低的，DNase I活性水平也许能作为评价疾病活动的指标；②与OA患者SF cfDNA水平相比，RA患者SF cfDNA水平是明显升高的，而SFDNase I活性明显降低甚至缺失。cfDNA是NETs上的主要成分，RA患者SFcfDNA可能更多来源于NETs，DNase I活性受损可能是NETs形成增强的原因并在RA发病机制中起作用。