声明
第一章 引 言
1.1 神经胶质瘤概述
1.2 肿瘤细胞能量代谢特征
1.2.1 肿瘤细胞与正常细胞能量供给差异
1.2.2 肿瘤细胞线粒体功能障碍
1.3 肿瘤细胞侵袭和迁移
1.3.1参与肿瘤侵袭、转移的信号分子
1.3.2糖代谢方式的改变与肿瘤细胞侵袭、转移的相关性
1.4 线粒体移植概述
1.4.1 线粒体移植的方法
1.4.2 线粒体移植恢复损伤细胞功能原理
1.4.3 线粒体移植治疗线粒体缺陷性疾病研究进展
1.4.4线粒体移植在肿瘤治疗领域的基础研究
第二章 线粒体移植方法鉴定
2.1实验材料
2.1.1 主要实验仪器
2.1.2 主要实验试剂
2.2实验方法和步骤
2.2.1 细胞培养及冻存
2.2.2线粒体提取及移植
2.2.3线粒体活性鉴定
2.2.4线粒体移植追踪观察
2.2.5 基因测序验证线粒体移植结果
2.2.6 PCR实验验证游离线粒体进入U87细胞后ND1基因的扩增
2.2.7 Western Blot实验验证游离线粒体进入U87细胞后的复制
2.3 结果
2.3.1 游离线粒体活性初步鉴定结果
2.3.2 线粒体移植追踪观察结果
2.3.3 基因测序验证线粒体移植结果
2.3.4游离线粒体进入U87细胞后功能鉴定结果
2.4 讨论
第三章 线粒体移植对U87细胞辐射敏感性的影响
3.1 实验材料
3.1.1 主要实验仪器
3.1.2 主要实验试剂
3.2实验方法和步骤
3.2.1 细胞培养及冻存
3.2.2 实验分组及照射条件
3.2.3线粒体提取及移植
3.2.4 线粒体荧光定量
3.2.5 Western blot检测蛋白表达水平变化
3.2.6 Annexin V/PI双染检测细胞凋亡
3.2.7 RT-CES实时分析监测系统监测细胞指数
3.2.8克隆形成实验
3.2.9 统计学方法
3.3 结果
3.3.1 X射线照射引起线粒体荧光强度降低
3.3.2 线粒体移植增强X射线辐射后的U87细胞内凋亡通路的活化
3.3.3 线粒体移植促进X射线诱导的U87细胞凋亡
3.3.4线粒体移植增强X射线照射对细胞增殖的抑制作用
3.3.5 线粒体移植降低细胞克隆形成数量
3.4 讨论
第四章 线粒体移植对ρ0细胞辐射敏感性的影响
4.1实验材料
4.1.1主要实验仪器
4.1.2主要实验试剂
4.2实验方法和步骤
4.2.1细胞培养及冻存
4.2.2ρ0细胞的构建
4.2.3ρ0细胞的鉴定
4.2.4照射条件
4.2.5单细胞电泳实验
4.2.6 免疫荧光实验观察细胞核内γ-H2AX表达量
4.2.7克隆形成实验
4.2.8 统计学方法
4.3.1ρ0细胞的鉴定结果
4.3.2 单细胞电泳实验结果
4.3.3γ-H2AX染色观察结果
4.3.4克隆形成实验结果
4.4讨论
第五章 线粒体移植联合X射线对U87细胞恶性表型的影响
5.1实验材料
5.1.1 主要实验仪器
5.1.2 主要实验试剂
5.2实验方法和步骤
5.2.1 细胞培养及冻存
5.2.2 实验分组及照射条件
5.2.3线粒体提取及移植
5.2.4 细胞伪足分布观察
5.2.5 Western blot检测蛋白表达水平变化
5.2.6 细胞迁移能力检测
5.2.7 U87细胞侵袭能力检测
5.2.8 统计学方法
5.3结果
5.3.1 线粒体移植后U87细胞恶性程度明显下降
5.3.2 线粒体移植后U87细胞侵袭相关蛋白表达量下降
5.3.3 线粒体移植增强X射线对U87细胞迁移功能的抑制
5.3.4 线粒体移植增强X射线对U87细胞侵袭功能的抑制
5.4 讨论
第六章 结 论
参考文献
在校期间研究成果
致谢
