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慢病毒介导microRNA-138过表达抑制胰腺癌细胞Panc-1与Aspc-1侵袭迁移能力的研究

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中文摘要

前言

材料与方法

1. 胰腺癌细胞系培养

2. 质粒的构建、鉴定与扩增

3 慢病毒制作

4.慢病毒感染胰腺癌细胞

5.实时荧光定量PCR检测hsa-miR-138在胰腺癌中的表达

6. Transwell小室迁移实验

7.Transwell小室侵袭实验

8. 统计学分析

实验结果

1.重组慢病毒质粒载体plenti-GFP-miR-138 的测序鉴定

2.LV- plenti-GFP-miR-138慢病毒制备和滴度测定

3.Real-time Q-PCR检测miR-138在胰腺癌细胞中的表达

4. LV-plenti-GFP-miR-138对人胰腺癌细胞侵袭增值能力的影响

5. miR-138表达水平与细胞侵袭迁移能力之间的相关性的分析

讨论

实验结论:

参考文献

英文摘要

致谢

缩略词表

声明

综述:MicroRNA与胰腺癌关系的研究进展

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摘要

目的:探讨人microRNA-138在胰腺癌细胞Panc-1与Aspc-1的表达及对细胞侵袭迁移作用的影响。方法:制作过表达hsa-miR-138的慢病毒并感染人胰腺癌细胞系Panc-1与Aspc-1,并设置空白对照组与无关序列包装病毒对照组;后通过Real-timePCR检测各细胞系中hsa-miR-138的表达量,并用Transwell法检测肿瘤细胞的侵袭迁移能力。结果:慢病毒感染胰腺癌后细胞内hsa-miR-138水平显著升高,且miR-138表达量与细胞侵袭迁移能力之间存在线性关系,miR-138表达量越高,细胞的侵袭与迁移数目越少。

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