hTERT和p53在神经胶质细胞瘤中相关性的实验研究

摘要

目的：探讨人端粒酶催化亚单位(hTERT)mRNA、p53蛋白在不同级别神经胶质细胞瘤中的表达情况，以及和神经胶质细胞瘤恶性级别、患者年龄及性别的关系。
　　方法：①收集手术切除胶质瘤患者的病灶组织，采用机械分离法获取胶质瘤细胞，通过差速贴壁、反复传代纯化，获得纯度高、生物性状稳定、增殖能力强的细胞株；从中选取部分通过免疫组化技术鉴定原代细胞及其纯度；剩余原代培养部分以及常规高血压脑出血、脑外伤术中内减压的正常脑组织，分别用RT-PCR、SP免疫组化、Westen bloting等方法检测不同级别神经胶质细胞瘤和正常脑组织中hTERT mRNA和p53蛋白的表达。
　　结果：按WHO（2007）中枢神经系统肿瘤分类标准：10例星形细胞瘤（Ⅱ级）、18例间变形星形细胞瘤（Ⅲ级）、30例胶质母细胞瘤例（Ⅳ）中，hTERT mRNA和p53蛋白的阳性表达率均显著高于正常脑组织（P＜0.05），正常脑组织中未检测出hTERT和p53阳性表达。58例神经胶质细胞瘤中，p53蛋白和hTERT mRNA的表达均有相关性，Pearson相关系数为0.605（P＜0.05），并且与神经胶质细胞 WHO（2007）分级有明显相关性（P＜0.05）；hTERT、p53的表达上调与患者年龄、性别无明显相关性（P＞0.05）。
　　结论：⑴神经胶质细胞瘤中，变异型 p53的表达在 mRNA及蛋白水平上较正常脑细胞明显上调，且与其恶性程度分级呈正相关；⑵hTERT mRNA表达较正常脑细胞明显上调；⑶p53和hTERT mRNA的表达与患者年龄、性别无显著相关性；⑷p53表达的上调同hTERT mRNA的激活存在重要相关性，在神经胶质瘤的发生、发展过程中起到至关重要的作用，可能成为判断其病例级别、评估预后的一个新的参考指标和新基因治疗的靶点。

目录

中文摘要

前言

一、材料与方法

(一)实验材料

（二）、实验方法

二、结果

l、倒置相差显微镜观察人胶质瘤原代培养细胞

2、传代培养，差速贴壁纯化细胞：

3、第3代人胶质瘤细胞的免疫组化鉴定：

4、 细胞生长曲线：

5、Western bloting检测hTERT和p53表达结果：

三、讨论

参考文献

声明

综述： hTERT 和P53在神经胶质瘤中表达及意义