shRNA抑制FAK表达治疗胃癌转移实验研究

摘要

目的:构建FAK RNAi慢病毒载体，探讨其对胃癌细胞增殖活性、侵袭及转移能力影响，为胃癌新的基因疗法提供依据。
　　 研究方法:
　　 1.构建FAK RNAi慢病毒载体，通过绿色荧光蛋白报告基因GFP检测转基因效率。
　　 2.重组慢病毒感染胃癌细胞SGC7901，MTT法检测FAK沉默对SGC7901细胞增殖的影响，并通过Western blot法检测FAK干扰前后SGC7901细胞中FAK表达的变化。
　　 3.制备Transwell小室，检测FAK沉默对SGC7901细胞侵袭及转移能力的影响。
　　 结果:
　　 1.成功构建了靶向FAK的RNAi慢病毒载体，其对胃癌细胞SGC7901细胞具有稳定感染能力。
　　 2.MTT检测并绘制细胞生长曲线，可见干扰组胃癌SGC7901与未处理组及阴性对照组相比，生长明显抑制(P＜0.05)，未处理组及阴性对照组无明显差别(P＞0.05)。Western blot方法检测FAK蛋白水平表达发现，干扰组胃癌SGC7901细胞较未处理组及阴性质粒对照组，FAK的表达均明显降低。
　　 3.体外侵袭与转移实验：对比未处理组及阴性对照组细胞，干扰组细胞侵袭及转移能力明显下降(P＜0.05)，正常组及阴性对照组细胞之间无明显差别(P＞0.05)。
　　 结论:
　　 1.成功构建FAK的RNAi慢病毒载体。
　　 2.重组慢病毒载体有效抑制感染胃癌SGC7901细胞增殖活性。
　　 3.FAK沉默明显抑制胃癌SGC7901细胞侵袭及转移能力。

目录

文摘

英文文摘

声明

前言

第一部分 FAK shRNA慢病毒载体的构建及鉴定

材料与方法

结果

讨论

第二部分 RNAi沉默FAK表达对SGC7901细胞株增殖、侵袭及转移能力的影响

材料与方法

结果

讨论

全文结论

参考文献

致谢

综述 胃癌基因治疗进展