中国南方汉族激素耐药型肾病综合征儿童NPHS2基因突变分析

摘要

本文主要从以下几个部分展开论述：
　　第一部分中国南方汉族散发性激素耐药型肾病综合征儿童NPHS2基因突变分析。
　　目的：分析中国南方汉族散发性激素耐药型肾病综合征（s tero id-res is tant nephrotic syndrome，SRNS）儿童NPHS2基因突变及其特点。
　　方法：研究对象为52例中国南方汉族散发性SRNS患儿，对照人群为50例尿检正常的健康志愿者。取所有研究对象外周静脉血3ml，提取基因组DNA；PCR扩增NPHS2基因全部外显子及其周围的部分内含子；应用DNA序列直接测定法对PCR产物进行测序。
　　结果：在1例南方汉族散发性SRNS患儿中检出NPHS2基因杂合突变—148C>T（R50W），突变检出率为1.9％。此外，还检出4个已报道的NPHS2基因多态性—102A>G、288C>T、954C>T和1038A>G；它们在52例SRNS患儿中的基因型和等位基因频率与其在50例正常对照人群中的基因型和等位基因频率分别比较，P值均＞0.05。
　　结论：中国南方汉族散发性SRNS患儿存在NPHS2基因突变，提示对中国南方汉族散发性SRNS患儿需进行NPHS2基因突变分析。
　　第二部分中国南方汉族家族性激素耐药型肾病综合征家系NPHS2基因突变分析
　　目的：分析中国南方汉族家族性激素耐药型肾病综合征（s tero id-res is tant nephrotic syndrome，SRNS）家系NPHS2基因突变及其特点。
　　方法：研究对象为一个中国南方汉族家族性SRNS家系中的先证者及其姐和父母，对照人群为50例尿检正常的健康志愿者。取所有研究对象外周静脉血3ml，提取基因组DNA；PCR扩增NPHS2基因全部外显子及其周围的部分内含子和启动子区全长序列；应用DNA序列直接测定法对PCR产物进行测序。
　　结果：本研究在一个中国南方汉族家族性SRNS家系中先证者的NPHS2基因8个外显子和周围部分内含子及启动子区全长未检出致病突变。在先证者及其姐和父母的NPHS2基因外显子1检出1个变异—102A>G（G34G），在NPHS2基因启动子区检出3个变异—-1000A>T、-670C>T和-537_-531delCTTTTTT。这4个NPHS2基因变异在50例正常对照人群中均有检出，为已知的NPHS2基因多态性。
　　结论：NPHS2基因突变不是本研究南方汉族家族性SRNS家系的主要致病原因。

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前言

1 中国南方汉族散发性激素耐药型肾病综合征儿童NPHS2基因突变分析

1.1 实验材料

1.1.1 研究对象

1.1.2 标本收集

1.1.3 引物设计

1.1.4 主要仪器

1.2方法

1.2.1 基因组DNA的提取与定量

1.2.2 PCR扩增NPHS2基因的8个外显子

1.2.3 DNA序列测定

1.2.4 DNA序列分析

1.2.5 NPHS2基因变异位点查新

1.2.6应用生物信息学软件对新发现的变异进行致病性预测

1.2.7 统计学分析

1.3结果

1.3.1 52例散发性SRNS患儿临床病理资料

1.3.2 52例散发性SRNS患儿NPHS2基因检测结果

1.3.3 52例散发性SRNS患儿NPHS2基因变异致病性预测结果

1.3.4 52例散发性SRNS患儿NPHS2基因型和等位基因频率分析

1.4讨论

1.5结论

2 中国南方汉族家族性激素耐药型肾病综合征家系NPHS2基因突变分析

2.1实验材料

2.1.1 研究对象

2.1.2 标本收集

2.1.3 引物设计

2.1.4 主要仪器

2.1.5 主要药品试剂及配制

2.2方法

2.2.1 基因组DNA的提取与定量

2.2.2 PCR扩增NPHS2基因8个外显子

2.2.3 PCR扩增NPHS2基因启动子区

2.2.4 DNA序列测定

2.2.5 DNA序列分析

2.2.6 NPHS2基因变异位点查新

2.3结果

2.3.1 NPHS2基因8个外显子突变分析结果

2.3.2 NPHS2基因启动子区突变分析结果

2.4讨论

2.5结论

参考文献

附录

成果

致谢

综述