汉族马凡综合征患者基因突变及临床特征的研究

摘要

目的：
　　对汉族马凡综合征(Marfa n syndro me， MFS）患者的原纤维蛋白－1（fibrillin-1，FBN1）基因，转化生长因子受体1（Transforming Growth Factor Beta Receptor TypeⅠ，TGFBR1）和转化生长因子受体2（Transforming Growth Factor Beta Recep tor TypeⅡ， TGFBR2）进行基因突变筛查，明确相应MFS患者的发病原因，并研究其临床特征。
　　方法：
　　提取29例汉族MFS患者的基因组DNA，PCR扩增FBN1的65个外显子， TGFBR1的9个外显子，TGFBR2的7个外显子，应用DHPLC-DNA测序方法检测基因突变，对未发现突变的病人，应用多重连接探针扩增技术(Multiplex Ligation-dependent Probe Amplification；MLPA)检测FBN1和TGFBR2是否存在缺失突变。
　　结果：
　　1、在29例MFS患者中发现12种FBN1基因突变，其中有7种错义突变，2种无义突变，2种剪切位点突变，1种移码突变。12种突变中，有8种为新发现的突变，分别为2359A>T(S787C)、3380G>T(G1127V)、4151T>C(M1384T)、4244G>A(C1415Y)、6071G>T(C2024F)、IVS2+1G>T、IVS37+5G>A和7970 C>G+7971 delC；在FBN1中发现11种多态性，其中6种为新发现的多态性：IVS43-30delCCT、IVS45-63G>T、IVS47-28C>T、IVS52+127T>C、IVS52-23G>C、IVS57+63A>C。
　　2、TGFBR1发现4种多态性，其中3种为新发的多态性：IVS6+109A>C、1032T>C(N344N)和1216T>C(L406L)；TGFBR2发现4个多态性均已报道。
　　3.、MLPA未检测出FBN1和TGFBR2的缺失突变。
　　4、本研究小组2004年至今共发现的25例汉族MFS FBN1突变患者。临床表现的比较分析显示：本组MFS患者骨骼系统主要标准发生率和晶状体异位发生率低于西方MFS患者（12％v s32%；P<0.05和12%v s54%；P<0.01），升主动脉夹层发生率高于西方MFS患者(48%v s14%；p<0.01)。
　　结论：
　　1、DHPLC-DNA测序是一种快速有效的FBN1突变检测法，可用于MFS的基因诊断；
　　2、FBN1基因突变可能是12例MFS患者的致病因素；
　　3、汉族MFS患者与西方MFS患者的临床表现存在某些差异。

目录

封面

声明

目录

中文摘要

英文摘要

前言

材料

一、主要试剂

二、主要仪器

三、研究对象

方法

一、 基因组DNA的抽提

二、聚合酶链反应(Polymerase chain reaction, PCR)反应

三、DHPLC (Denaturing high-pe rformance liquid chromatography)-异源双链分析

四、DNA测序

五、多重连接探针扩增技术(Multiplex Ligation-dependent Probe Amplification；M LPA)分析

结果

一、D HPLC初筛分析及测序结果

二、发现的突变及多态性

三、FBN1基因突变及临床表现

讨论

一、筛查方法比较

二、FBN1，TGFBR1和TGFBR2基因突变及多态性

三、临床特征

结论

参考文献

致谢

基因突变检测技术在遗传病学的应用及进展

参考文献