SAT法在骨科住院患者MRSA筛查中的应用

摘要

目的：了解骨科住院患者耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（Methicillin-Resistant Staphylococcus Aureus，MRSA）定植情况及其危险因素；探讨实时荧光核酸恒温扩增检测（Simultaneous Amplification and Testing，SAT）技术在鼻拭子MRSA检测中的应用价值。
　　方法：收集我院2016年12月至2017年2月入院48 h内202例骨科患者鼻拭子标本。实验组采用SAT法，将磁珠法提取的靶标RNA在逆转录酶和聚合酶作用下进行RNA恒温扩增，新合成的RNA与分子信标结合后进行实时荧光检测，根据荧光扩增曲线及阈值线判定 MRSA检测结果；对照组选用MRSA显色培养基鉴定法（显色法），将标本直接接种到MRSA鉴定培养基上，于37℃有氧条件下孵育48h，依据培养基上是否出现绿色典型形态菌落判断MRSA检测结果。根据实验组和对照组的MRSA检测结果，比较SAT法和显色法检测MRSA的敏感性、特异性和阳性率等指标，分析该组病例MRSA的定植情况及其危险因素。
　　结果：
　　1、本课题研究的202例鼻拭子标本，采用显色法进行 MRSA检测的阳性率为1.0%（2/202），SAT法的阳性率为5.4%（11/202），有9份两种方法检测的结果存在差异（均为SAT法阳性而显色法阴性），经配对χ2检验结果显示差异有统计学意义（χ2=7.11，P=0.004，即P＜0.05），且SAT法检测MRSA的敏感性、特异性、阳性率均明显优于显色法。
　　2、根据SAT法检测MRSA的结果分析，本组骨科住院患者鼻拭子标本MRSA检测的阳性率为5.4%，其中关节外科、脊柱外科、创伤骨科3个病房的阳性率分别为7.2%、4.2%、3.0%。骨科3个病区住院患者MRSA定植阳性率之间的比较，经χ2检验结果显示差异无统计学意义(χ2=1.23，P=0.54，即P＞0.05)，且骨科住院患者MRSA定植的概率与病区不同无关。
　　3、经单因素χ2检验结果显示，是否合并有糖尿病、是否有手术史与是否为MRSA定植有关，是影响MRSA定植的危险因素（P＜0.05），且合并有糖尿病患者MRSA定植的概率高于无糖尿病患者，且有手术史患者MRSA定植的概率高于无手术史患者。
　　4、经多因素二项Logistic回归分析结果显示，最后纳入模型的自变量包括高血压、糖尿病、手术史3个指标（P＜0.05），且合并有糖尿病的患者MRSA定植的概率是无糖尿病患者的40.314倍，且有手术史的患者MRSA定植的概率是无手术史患者的8.399倍，且有高血压的患者 MRSA定植的概率是无高血压患者的0.031倍。因此，合并有糖尿病和手术史是骨科住院患者 MRSA定植的独立危险因素，而合并有高血压为保护因素。
　　结论：
　　1、SAT法能快速、准确地进行患者鼻拭子MRSA的直接检测，其敏感性、特异性、阳性率等指标均优于显色法，是一种新型、有效的MRSA检测方法。
　　2、在本研究的骨科住院患者中，整体MRSA定植的阳性率为5.4%，糖尿病史、手术史是MRSA定植的独立危险因素，针对糖尿病史、手术史患者进行MRSA筛查可以提高成本和临床效益。

目录

声明

英文缩略表

前言

材料和方法

1. 一般资料

2. 实验方法

3. 数据统计

结果

1. 显色法和SAT法检测MRSA的结果判断

2. SAT法和显色法检测MRSA结果的对比分析

3. 骨科住院患者MRSA的定植情况及其危险因素分析

讨论

一、MRSA病原体的快速检测

二、实时荧光核酸恒温扩增检测

三、MRSA的定植情况及其危险因素

四、课题研究的局限性及展望

结论

参考文献

课题综述:耐甲氧西林金黄色葡萄球菌筛查的研究进展

致谢