ISSR和TRAP分子标记在茶树遗传多样性分析上的应用研究

摘要

我国茶树的品种资源十分丰富，本研究利用ISSR分子标记技术和TRAP技术分别对分布在全国的51个茶树品种和16个茶树品种进行研究，分析探讨它们之间的亲缘关系与遗传多样性。结果如下： 1．在前人研究的基础上，本研究结合茶树特点，进行综合设计，对茶树不同部位的DNA进行了比较，并对前人方法进行改良，探索出一套操作简便、快速、准确的高质量茶树DNA提取和纯化技术。 2．从40条ISSR引物中筛选出12条在所有样品中均能扩增出清晰条带的ISSR引物，共扩增出62条ISSR标记带，其中多态性带53条，多态性百分率为85.5％。 3．从35对TRAP引物组合中，选用了18对多态性较好的组合，总共产生了72条条带，其中多态性条带56条，占总条带的77.78％，条带大小大约在100 bp-800 bp，平均每个引物扩增4条，多态性最高为100％，最低为33％。 4．依据ISSR和TRAP结果分析了它们之间的遗传相异性系数，并绘制了遗传关系树状图，揭示了不同省(区)地方性的茶树品种之间遗传多样性、遗传相似性与亲缘关系。

目录

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摘要

1前言

1.1茶树品种资源遗传多样性研究的意义

1.2茶树遗传多样性的研究

1.2.1茶树的起源与进化

1.2.2茶树的分类

1.2.3我国茶树品种的遗传多样性

1.3分子标记在茶树研究中的应用

1.3.1几种分子标记在茶树上适用性的研究

1.3.2茶树的遗传多样性

1.3.3遗传稳定性分析

1.3.4茶树品种鉴别

1.3.5茶树分子遗传图谱的构建

1.3.6分子标记在其它方面的应用

1.4ISSR和TRAP标记研究进展

1.4.1简单重复间序列(ISSR)

1.4.2目标区域扩增多态性(TRAP)

1.5本研究的目的意义、研究内容与技术路线

1.5.1本研究的目的意义、研究内容

1.5.2技术路线

2材料和方法

2.1供试材料

2.1.1供试材料的类型及用途

2.1.2主要试剂

2.1.3主要仪器设备

2.1.4主要试剂的配制

2.1.5本研究中用到的引物

2.2实验方法

2.2.1基因组DNA提取的改良

2.2.2茶树不同部位DNA提取效果比较

2.2.3基因组DNA紫外分光光度计检测及电泳检测

2.3 ISSR和TRAP的反应体系及扩增程序

2.3.1 ISSR反应体系及扩增程序

2.3.2 TRAP反应体系及扩增程序

2.4结果显示

2.5扩增条带的统计

2.5.1多态位点的分析

2.5.2数据的统计

3结果与分析

3.1茶树基因组DNA的提取

3.1.1不同提取方法比较

3.1.2不同部位比较

3.1.3供试材料DNA提取的电泳检测及分光光度计检测

3.2 ISSR分子标记及聚类结果

3.2.1 ISSR电泳图谱

3.2.2引物多态性分析

3.2.3供试品种遗传关系树状图

3.3TRAP标记结果与分析

3.3.1部分TRAP标记电泳图谱

3.3.2 引物多态性分析

3.3.3品种间亲缘关系的聚类分析

4讨论

4.1我国茶树种质资源的多样性

4.2 ISSR反应稳定性及影响因素

4.3茶树ISSR和 TRAP分子标记分析比较

4.4 TRAP所用材料的抗旱性分析

参考文献

硕士期间发表及投稿论文

致谢