雷公藤角斑病菌的生物学特性研究

摘要

角斑病是严重影响雷公藤(Tripterygium wilfordii)生产的一种主要病害，尤其在湿热气候条件下发病更重。病菌侵染后雷公藤植株大量叶片提前脱落，出现弱株或死株，使得根、叶产量下降。
　　 本研究通过分离雷公藤角斑病菌，根据病菌形态特征及致病性试验，参照刘锡琎和郭英兰分类方法，鉴定所分离菌为福木假尾孢(Pseudocercospora elaeodendri)。进一步扩增此病菌的基因间隔序列(internal transcribed sequence，ITS)，测序后于基因数据库(NCBI)中进行同源性比对，结果未发现数据库中有福木假尾孢菌ITS序列的报道，但试验菌株与紫丁香中分离的未定种名的假尾孢菌(Pseudocercospora sp.)序列相似性为100％，可初步认为二者是同一种菌；在此基础上，从基因数据库中选取19个相似性高的菌株的ITS序列与试验菌株构建系统发育树，结果显示试验菌株仅与紫丁香中分离的假尾孢菌聚为一类，分子系统发育的研究结果佐证了形态分类学的结论。
　　 对福木假尾孢的生物学特性研究表明：菌丝日生长速率几乎相同，培养20d后菌落开始老化。菌丝生长适温为27℃～29℃，最适培养基为胡萝卜，pH值为4.5～9均适合，光照条件对菌丝生长没影响；供试培养基中燕麦培养基产孢最多，31℃利于产孢，最适产孢pH值为6，暗条件适合产孢；分生孢子在3h开始萌发，芽管平均长度为6.6μm,7h萌发率在90％以上，芽管平均长度为32.5μm。孢子可在其任意位置最先萌发，两端细胞最先萌发的概率为82％左右。孢子萌发可产生1～7个芽管，且萌发时隔膜处会向内缢缩。最适萌发温度为29℃～31℃。最适pH值为3，雷公藤汁液及暗培养条件对孢子萌发有促进作用，同时萌发需要一定的湿度。显微观察结果表明：雷公藤叶上表皮无气孔，下表皮气孔密度为214.55个·mm-2，人工培养菌落在2d后可产孢，孢子接种雷公藤叶片24h时萌发的芽管通过气孔直接侵入。
　　 用8种真菌杀菌剂防治雷公藤角斑病，室内孢子毒力试验表明：浓度70mg·L-1嘧霉胺及100mg·L-1的异菌脲、甲基硫菌灵、三唑酮对分生孢子萌发的抑制率均小于10％。孢子萌发抑制效果以75％百菌清WP最好，EC50=0.49mg·L-1，EC=0.78mg·L-1，其次是25％腐霉利WP,80％代森锰锌WP。以75％百菌清WP及25％腐霉利WP作野外病苗防治试验结果表明25％腐霉利WP500倍的防治效果较好。