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草菇G蛋白/cAMP通路构建及其在子实体形成中的表达分析

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第一章 引言

1.1草菇的研究概况

1.2 G蛋白介导的cAMP信号通路的研究进展

1.3 cAMP含量的测定方法

1.4 本课题研究的意义和目的

第二章 草菇G蛋白介导的cAMP信号通路的构建

2.1实验所用材料

2.2 实验方法

2.3 结果与分析

2.4讨论

第三章 基因分析

3.1 实验材料

3.2实验方法

3.3 实验结果

3.4讨论

第四章 相关蛋白编码基因的表达量分析

4.1 实验材料

4.2 实验方法

4.3 结果与分析

4.4 讨论

第五章 内源性cAMP含量的测定

5.1实验材料

5.2 实验方法

5.3讨论

参考文献

附 录

致谢

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摘要

已有报道,G蛋白介导cAMP信号通路与真菌子实体形成有关。草菇是一种草腐生型食用菌,以稻草、废棉、玉米芯为主要原料栽培,年产量近40万吨,位居各种食用菌的第六位,但由于产量低,影响其发展。本研究是在我们已完成草菇基因组测序的基础上,应用生物信息分析技术来构建与草菇子实体形成相关的G蛋白介导cAMP信号通路,以期能为草菇品种改良提供新的靶标或途径。
  分析结果表明,草菇基因组中携有G蛋白介导cAMP信号通路的相关蛋白编码基因,包含G蛋白信号调节因子(RGS)、G蛋白ɑ亚基(Gɑ)、腺苷酸环化酶(AC)、磷酸二酯酶(PDE)、蛋白激酶A调节亚基1(PKAr1)、蛋白激酶A调节亚基2(PKAr2)、蛋白激酶 A催化亚基1(PKAc1)和蛋白激酶 A催化亚基2(PKAc2)等8个基因,系统发育分析结果进一步证实了这些基因的注释的可靠性。
  本研究应用转录组测序技术,分析了上述8个基因的结构。应用表达谱分析上述8个基因在营养阶段、原基形成阶段及子实体生长阶段的表达量,应用实时定量 PCR技术验证表达谱的分析结果,研究结果表明,它们在原基形成时期高表达。本研究检测了营养阶段、原基形成阶段及子实体生长阶段的cAMP含量,检测结果其在原基形成时期含量显著高于营养阶段与子实体生长阶段。上述结果初步阐明了草菇G蛋白介导cAMP信号通路与子实体形成有关。

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