水仙多糖及生物碱的提取、纯化与检测

摘要

本文以漳州水仙为材料，采用用热水浸提、有机溶剂萃取分别提取多糖和生物碱，建立并优化了水仙多糖的提取纯化体系，优化了水仙生物碱的提取体系。后续又运用液相色谱、气相色谱、红外光谱等方法对水仙多糖进行了分析检测。希望能为以后水仙多糖和生物碱的研究提供方法参考，为开发水仙的经济价值提供新思路，让漳州水仙发挥更大的价值。本文的研究成果如下：
　　1.通过对水仙不同部位、不同取样时期多糖含量研究，得到结论：多糖含量的高低为休眠期水仙鳞茎球>开花期水仙鳞茎球>水仙花葶、花和叶。
　　2.通过正交试验对热水浸提法提取条件进行优化。建立了最优的提取体系为提取时间5.5 h，提取温度100℃，液固比10∶1（ml/g），乙醇加量比5∶1(醇沉时加入无水乙醇量 ml/样品溶液量 ml)。提取条件对提取水仙鳞茎粗多糖的影响主次顺序为：提取温度>液固比>提取时间>乙醇加量比。在最优条件下提取中国水仙粗多糖（CPNS），CPNS的得率为6.51%。
　　3.通过研究建立了水仙多糖纯化与检测体系：经过冻融分级,sevage法脱蛋白，透析法除小分子等步骤完成CNPS纯化，得到NPS。采用面积归一化法计算多糖样品纯度为99%。经过旋光仪测得水仙多糖的旋光值[α]D25=-17.0（c0.1；H2O）。采用红外光谱法测得水仙多糖为酸性β吡喃多糖。通过气相图谱分析，得知，水仙多糖由岩藻糖、甘露糖、半乳糖、葡萄糖组成，各单糖组分的摩尔比为2.39∶23.37∶1.00∶12.08。采用高效体积排阻色谱法（HPSEC）测得出水仙精多糖的相对平均分子量约为30900 Da。
　　4.通过对比多糖和生物碱的溶解性质，本研究创新性地以水仙鳞茎提取多糖后的残渣为材料提取生物碱，并对水仙生物碱的提取方法进行筛选优化。得到最优提取条件为料液比为1∶20，提取温度为70℃水浴，提取时间4 h，萃取溶剂选用三氯甲烷，萃取2次。在此最优条件下提取生物碱的得率达到0.077%。
　　综上所述，通过对水仙多糖和生物碱的研究，分别建立水仙多糖的提取纯化体系和水仙生物碱的提取分离体系，并对水仙多糖的结构特征进行了分析检测，为以后研究多糖和生物碱提供参考，为开发水仙的生物活性物质提取提供了新思路，为开发水仙的经济价值提供新途径。

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第一章 绪论

1 水仙的研究现状及价值

2 多糖的研究现状

3 生物碱的研究现状

4 技术路线

5 本研究的内容和意义

第二章 水仙多糖提取工艺研究

1 实验材料

2 试剂与仪器

3 实验方法

4 结果与分析

5 讨论与小结

第三章 水仙多糖的纯化与鉴定

1 实验材料

2 试剂与仪器

3 实验方法

4 结果与分析

3 小结与讨论

第四章 水仙生物碱的提取工艺研究

1 材料与方法

2 结果与分析

3 小结与讨论

第五章 总结与展望

1 总结

2 展望

参考文献

致谢