富含原花青素、叶酸和游离氨基酸的茶树优异种质资源的研究

摘要

原花青素具有强的抗氧化、预防心血管疾病和抗肿瘤等作用，叶酸具有预防巨红细胞贫血、神经管畸形儿、修复DNA预防肿瘤和预防心血管疾病等作用；茶叶中的游离氨基酸具有促进茶汤鲜爽的作用。因此，筛选研究富含原花青素、叶酸和游离氨基酸的优异茶树种质资源可为茶树种质资源的品质遗传改良奠定基础，对人类的健康与疾病的预防有重要的意义。
　　本研究对茶叶中的原花青素、叶酸的提取条件进行优化，并选择了100份茶树品种和株系为试验材料，其中以生产上应用的品种宝洪茶为对照，对茶树种质资源中的原花青素、叶酸、游离氨基酸含量分布和组织差异进行研究，并分析了各成分含量水平之间的相关性。主要结果如下：
　　1.茶树种质资源原花青素含量差异的研究
　　（1）通过正交实验设计优化了茶样中的原花青素的提取条件。结果表明，其最佳提取条件为：摇床温度设为24℃，转速为165rpm，提取的时间为25min，甲醇提取剂的浓度为100％。
　　（2）不同品种和株系之间、不同季节之间和不同叶片成熟度之间的原花青素含量都存在着极显著的差异。说明基因型、采摘季节以及采摘标准是影响原花青素含量的重要因素。
　　（3）夏季和秋季里茶叶的原花青素含量随着叶片的成熟度的增加而增加，夏季的原花青素含量都高于秋季。其中，夏季里株系T48的老叶的原花青素含量最高为17.34%，是对照宝洪茶（6.68%）的2.6倍。而秋季里株系T51的老叶的原花青素含量最高为7.13%，是对照宝洪茶（4.29%）的1.66倍。
　　（4）原花青素广泛分布在茶树的花、叶、茎、茶籽壳中，茶花中的原花青素含量最高，其次是叶片，而茎、茶籽壳分布规律不一。其中株系T97老叶的原花青素含量最高，为8.15%，是对照宝洪茶（3.83%）的2.13倍。
　　（5）原花青素含量与游离氨基酸含量、黄酮类化合物含量呈极显著正相关的，与抑制羟自由基能力、叶酸含量呈显著正相关，与茶多酚含量、总抗氧化能力相关程度不显著。
　　2.茶树种质资源叶酸含量差异的研究
　　（1）通过对三种酶的使用量进行了优化，结果表明，用α淀粉酶100μL、蛋白酶40μL和大鼠血清100μL提取时获得的叶酸含量最高。
　　（2）不同品种和株系之间、不同季节之间和不同叶片成熟度之间的叶酸含量都存在着极显著的差异。说明基因型、采摘季节以及采摘标准是影响叶酸含量的重要因素。
　　（3）秋季的叶酸含量随着叶片成熟度的增加而逐渐下降，而在夏季其分布规律不一，但总体上一芽二叶的叶酸含量较高。其中，叶酸含量最高的是株系T14夏季采收的一芽二叶，为433.04ng/g，是对照宝洪茶(222.63ng/g)的1.95倍。
　　（4）叶酸广泛分布在茶树的花、叶、茎、茶籽壳中，同一株系不同器官之间的叶酸含量存在着极显著的差异，但其分布规律不一。
　　（5）叶酸含量与游离氨基酸含量和原花青素含量之间都呈显著的正相关，与总抗氧化能力、茶多酚含量、黄酮类化合物含量之间相关性不显著。
　　3.茶树种质资源游离氨基酸总量差异的研究
　　（1）不同品种和株系之间、不同季节之间和不同叶片成熟度之间的游离氨基酸总量都存在着极显著的差异。说明基因型、采摘季节以及采摘标准是影响游离氨基酸总量的重要因素。
　　（2）茶叶中游离氨基酸的含量随着叶片成熟度的增加而逐渐降低。一芽二叶中游离氨基酸分布趋势为春季＞秋季＞夏季，其中株系T23的游离氨基酸总量最高，为9.91%，是对照宝洪茶（4.87%）的2.03倍。
　　（3）游离氨基酸广泛分布在茶树的花、叶、茎、茶籽壳中，不同器官之间的游离氨基酸含量存在着极显著的差异，分布趋势是花＞老叶＞茎＞茶籽壳。
　　（4）游离氨基酸含量与叶酸含量呈显著的正相关，与原花青素含量呈极显著的正相关，与茶多酚含量、黄酮类化合物含量相关程度不显著。

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第一章 文献综述

1茶树种质资源的概况

2原花青素的概况

2.1 原花青素的结构与性质

2.2原花青素的功效

2.3原花青素的提取和分析方法

3叶酸的概况

3.1叶酸的结构与性质

3.2叶酸的功效

3.3叶酸的提取和分析方法

4茶叶中氨基酸和茶多酚的功效概况

4.1 氨基酸

4.2茶多酚

5本研究的目的及意义

第二章 茶树种质资源中原花青素含量差异的研究

1 材料与方法

1.1 实验材料

1.2试剂

1.3 茶树种质资源中原花青素提取条件的优化

1.4原花青素标准曲线的制备

1.5 茶树种质资源中原花青素的测定

1.6试验统计分析方法

2 结果与分析

2.1 原花青素标准曲线的绘制

2.2茶树种质资源中原花青素提取的优化条件

2.3 不同处理方式对鲜样的不同部位的原花青素含量的影响

2.4 同一季节不同株系的原花青素含量差异的研究

2.5 同一株系不同季节的原花青素含量差异的研究

2.6 同一株系不同器官部位的原花青素含量差异的研究

2.7 原花青素含量与其抑制羟自由基能力、总抗氧化能力的相关性研究

2.8 同一株系叶片中游离氨基酸含量、叶酸的含量与原花青素含量的相关性

2.9 同一株系叶片中原花青素含量与其茶多酚和黄酮类化合物含量的相关性

3 小结与讨论

3.1 小结

3.2 讨论

第三章 茶树种质资源中游离氨基酸差异的研究

1 材料与方法

1.1 实验材料

1.2试剂

1.3 游离氨基酸含量测定方法的优化

1.4 茶氨酸标准曲线的制备

1.5 茶树种质资源中游离氨基酸含量的测定

1.6统计分析方法

2 结果与分析

2.1 显色条件的选择

2.2 茶氨酸标准曲线的绘制

2.3 不同处理方式对鲜样的不同部位游离氨基酸含量的影响

2.4 不同提取方法和过滤方式对游离氨基酸含量的影响

2.5 同一季节不同株系的游离氨基酸含量差异的研究

2.6 同一株系不同季节的游离氨基酸含量差异的研究

2.7 同一株系不同器官部位的游离氨基酸含量差异的研究

2.8同一株系叶片中原花青素含量、叶酸含量与其游离氨基酸含量的相关性

2.9 同一株系叶片游离氨基酸含量与其茶多酚、黄酮类化合物含量的相关性

3 小结与讨论

3.1 小结

3.2 讨论

第四章 茶树种质资源中叶酸含量差异的研究

1材料与方法

1.1 实验材料

1.2试剂

1.3 茶树种质资源的叶酸含量测定

1.4 统计分析方法

2 结果与分析

2.1三酶使用量的优化

2.2 叶酸标准曲线的绘制

2.3 不同处理方式对鲜样的不同部位的叶酸含量的影响

2.4 同一季节不同株系的叶酸含量差异的研究

2.5 同一株系不同季节的叶酸含量差异的研究

2.6 同一株系不同器官部位的叶酸含量差异的研究

2.7叶酸含量与总抗氧化能力相关性的研究

2.8 同一株系叶片中游离氨基酸含量、原花青素含量与其叶酸含量的相关性

2.9同一株系叶片叶酸含量与其茶多酚、黄酮类化合物含量的相关性

3 小结与讨论

3.1 小结

3.2 讨论

结论

附录

致谢