黄粉虫抗菌肽诱导方法的比较及实时荧光定量PCR分析

摘要

为了给黄粉虫抗菌肽研究提供新的参考，探索黄粉虫抗菌肽的较优诱导方法，本论文以不同龄期的黄粉虫幼虫为试验材料，以大肠杆菌和金黄色葡萄球菌作为诱导菌，微量注射、饲喂和针刺作为诱导方法诱导黄粉虫幼虫产生抗菌肽，对不同菌液浓度和不同方法诱导的不同龄期黄粉虫幼虫抗菌肽的抑菌效果进行研究，同时还进行了黄粉虫抗菌肽Tenecin1、Tenecin3、Tenecin4及Coleoptericin C四个基因的实时荧光定量PCR研究。结果如下：
　　1、不同龄期的黄粉虫幼虫产生的抗菌肽抑菌活性上存在差异。采用大肠杆菌和金黄色葡萄球菌作为诱导菌，对8龄、9龄和10龄的黄粉虫幼虫进行诱导后,发现其抗菌肽抑菌活性存在差异，在所有的诱导处理中，9龄幼虫的诱导效果好于8龄和10龄。
　　2、不同菌液浓度诱导黄粉虫幼虫产生的抗菌肽抑菌活性上存在差异。将对数期浓度稀释10倍、100倍、1000倍，经3种不同浓度的菌液诱导后发现，在所有的不同菌液浓度诱导处理中，菌液浓度为对数期浓度的稀释100倍时效果较好。
　　3、不同方法诱导产生的抗菌肽抑菌活性上存在差异。经相同浓度菌液诱导后发现，在所有的相同浓度菌液不同诱导方法处理中，微量注射诱导的效果较好。
　　4、黄粉虫抗菌肽Tenecin基因实时荧光定量PCR结果。通过对黄粉虫抗菌肽的Tenecin1、Tenecin3、Tenecin4和Coleoptericin C4个基因进行实时荧光定量PCR分析后发现，除Tenecin3基因经大肠杆菌诱导表达量下调外，其他抗菌肽基因都上调。

目录

封面

声明

目录

中文摘要

英文摘要

第一章 文献综述

1黄粉虫的研究进展

2抗菌肽的研究

3实时荧光定量PCR技术的研究

4本文研究的目的与意义

第二章 黄粉虫抗菌肽的诱导

1试验材料

2试验方法

3 结果与分析

4.小结与讨论

第三章 黄粉虫抗菌肽Tenecin、Coleoptericin基因实时荧光定量PCR分析

1 试验材料

2 试验方法

3 结果与分析

4 小结与讨论

第四章 总结与讨论

1主要结论

2讨论

3 本研究的创新与不足

4 展望

参考文献

附录ⅠGenbank 上查询得到黄粉虫抗菌肽 Tenecin、Coleoptericin和管家基因（18s rRNA）序列

附录Ⅱ黄粉虫抗菌肽抑菌效果图：

致谢