真姬菇SDF的酶法制备、纯化及应用研究

摘要

真姬菇(Hypsizigus)是一种很珍贵的食用菌，不但可以作为日常美味的饮食，其本身也具有很高的药用价值。随着其栽培技术和生产规模的不断扩大，其在市场上也变得越来越常见，价格也变得容易让消费者接受，加上其本身的营养价值和药用价值，近些年也成为了广大学者研究的热点。本文以真姬菇为原料，对真姬菇SDF的提取、粗SDF脱蛋白研究、SDF降血糖实验、SDF咀嚼片的研发，研究结果如下：
　　1.比较研究了水提法和纤维素酶法对于真姬菇可溶性膳食纤维提取率的影响。采用热水提取法提取真姬菇SDF，考察分析了提取温度、提取时间、料液比对SDF提取率的影响。结果表明，在单因素实验的基础上进行正交实验优化，经极差分析与方差分析，最优提取工艺为：提取温度为100℃，提取时间为3h，料液比为1:25g/mL，在上述条件下真姬菇SDF得率为8.6％。采用纤维素酶法提取真姬菇SDF，对加酶量、时间、温度、pH进行因素分析,以SDF提取率为指标进行响应面优化分析，结果表明：加酶量和温度、温度和时间、加酶量和pH、时间和pH之间的交互作用对真姬菇SDF的提取率的影响极显著(P<0.01)；温度和时间的交互作用对SDF提取率影响显著(P<0.05)；加酶量和时间的交互作用不显著(P>0.05)。最优的工艺参数为纤维素酶添加量0.6%、温度58℃、时间3.5h、pH5，在此条件下，真姬菇SDF提取率达10.18%±0.39%。
　　2.以真姬菇SDF保留率和蛋白脱除率为综合评价指标，分别采用sevage法、盐酸法、TCA法及几种蛋白酶法进行比较实验。结果表明：木瓜蛋白酶的方法效果最优，对木瓜蛋白酶进行正交实验优化，最佳工艺水平条件为：木瓜蛋白酶的添加量为1.0%、酶解温度为60℃、酶解时间2.5h、酶解pH为5.5，其中加酶量、温度、时间的影响都为极显著水平（P<0.01），pH的影响为显著水平（P<0.05），在此条件下真姬菇SDF蛋白质脱除率为85.92%，SDF保留率为90.21%。
　　3.用四氧嘧啶构建糖尿病小鼠模型，将脱蛋白后的真姬菇SDF用于小鼠的降血糖实验,实验周期为6周。实验结果表明，真姬菇SDF有降血糖作用。在灌药两周后，高剂量组SDF的血糖值略有下降，与模型组相比较已经有显著性差异（P<0.05）。中剂量组小鼠的在灌药六周后和模型对照组有了显著性差异（P<0.05）。低剂量组小鼠和模型对照组相比没有显著性差异（P>0.05）。
　　4.在单因素的基础上采用正交试验方案对真姬菇SDF咀嚼片工艺进行优化，确定真姬菇SDF咀嚼片的最优工艺参数为：真姬菇SDF的添加量为25%，微晶纤维素的添加量为5%，β-环状糊精的添加量为13%，SDF添加量和微晶纤维素的添加量对口感的影响都达到了极显著水平(P<0.01)。热风干燥时间为50℃、15min，造粒时喷洒的乙醇浓度为70%，在此实验工艺的条件下，片剂的口感较好。