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两种宿主来源毛首线虫形态学与分子生物学的分类研究

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重庆医科大学研究生学位论文独创性声明及版权使用授权书

符号说明

摘要

前言

材料和方法

结果

一、形态学初步鉴定

二、分子生物学方法结果

(一)、序列及初步分析

(二)、序列对比及同源性分析

(三)、PCRlinked RFLP分析

(四)、附表

讨论

结论

参考文献

文献综述毛首线虫属线虫分类学研究的回顾和进展

致谢

攻读学位期间发表的论文

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摘要

为了初步鉴定虫种并探讨两种毛首线虫与已知六种毛首线虫的亲缘距离,我们对这两种毛首线虫进行了形态学鉴别和分子生物学方法的分类学研究。本研究利用测微尺对虫体体长、输精管长、交合刺长、交合刺鞘刺高度等形态学体征进行了测量并显微镜拍照。并观察雄虫生殖器官形态学特点,与已知虫种进行比对,做出形态学初步鉴别。随后,抽提两种毛首线虫的DNA进行测序,并与已公布的六种毛首线虫的ITS2数据比较亲缘距离等数据,进行分类学研究。最后,将PCR产物纯化,选用MspⅠ和HaeⅢ两种限制性内切酶对纯化产物进行RFLP分析,并获得酶切图谱。 研究表明:①经形态学初步鉴定表明此两种毛首线虫有明显区别,阿拉伯狒狒来源毛首线虫测量数据在皮翼毛首线虫形态学数据范围内;松鼠猴来源毛首线虫测量数据与川金丝猴新种毛首线虫相近。②两种毛首线虫ITS2片断比较表明,二者属不同种。③将本次研究中两种毛首线虫ITS2序列数据与已知六种毛首线虫ITS2序列数据比较,表明这两种毛首线虫应分别隶属六种毛首线虫以外的虫种。④以八种毛首线虫ITS2数据为基础,首次尝试构建同源树和分子种系发生树。

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