B7-H4在人子宫颈癌的表达与T细胞浸润的相关性研究及其对外周血T细胞的免疫调节作用

摘要

目的:研究共刺激分子B7-H4在人子宫颈癌的表达及其与肿瘤内浸润的FOXP3+、CD4+T、CD8+T细胞数量和分泌细胞因子的关系。观察重组入B7-H4蛋白对宫颈癌患者外周血T细胞增殖周期、凋亡及分泌细胞因子的影响。
　　方祛:采用SP免疫组织化学染色检测B7-H4在30例正常人宫颈组织、30例高级别CIN(CINⅡ-Ⅲ)和67例子宫颈癌的表达;免疫荧光双标观察肿瘤内浸润的FOXP3+、CD4+T、CD8+T细胞数量及其TGF-β1和IFN-γ分泌情况。B7-H4与淋巴细胞混合培养48h后，采用流式细胞术分析B7-H4对15例宫颈癌患者外周血中活化的T细胞的细胞周期、凋亡及各亚群T细胞的影响，ELISA芯片检测培养上清液中细胞因子含量。
　　结果:B7-H4不表达于正常人宫颈上皮，仅在部分瘤变宫颈上皮微弱表达;子宫颈癌B7-H4的阳性表达率为46％(31/67)，显著高于正常人宫颈上皮和瘤变宫颈上皮(p＜0.01，p＜0.05);子宫颈癌B7-H4阳性组病灶内浸润的CD8+T细胞以及分泌IFN-γ的CD8+T数量显著低于B7-H4阴性组(p＜0.001，p＜0.035);B7-H4的表达与肿瘤内浸润的FOXP3+细胞、CD4+T细胞以及分泌TGF-β1的CD4+T细胞数量无关(p＞0.05，p＞0.05)。B7-H4与宫颈癌患者外周血T细胞混合培养48h后，G1、G2和S期T细胞分别占90.59％、8.55％和0.87％，而空白对照组分别占92.83％、6.09％和1.13％;B7-H4使CD4+T和CD8+T细胞的Ki67阳性率下降为2.13％±0.13％和1.03％±1.33％，低于空白对照组的Ki67阳性率2.74％±0.98％和1.71％±1.32％;B7-H4使混合培养T细胞CD8+T和CD4+T细胞占CD3+T细胞的比例下降，但CD4+T/CD8+T比值增高，而且CD4+CD25+Foxp3+T细胞增多;混合培养上清液中TGF-β1含量为259.25±32.78 pg/ml，与空白对照组202.75±20.17pg/ml相比稍高。B7-H4对宫颈癌患者外周血活化T细胞的凋亡无明显影响。
　　结论:B7-H4在人子宫颈癌细胞异常高表达，并与肿瘤内浸润的CD8+T细胞数量减少以及分泌IFN-γ减少有关，提示B7-H4在抑制肿瘤微环境的细胞免疫中发挥作用。B7-H4使宫颈癌患者外周血活化T细胞被阻滞于G2期，S期细胞明显减少;B7-H4抑制CD4+T和CD8+T细胞增殖，但对Foxp3+T增殖和分泌TGF-β1无明显影响;B7-H4对T细胞凋亡无明显作用。

目录

声明

英汉缩略语名词对照

摘要

第一部分 B7-H4在人子宫颈癌的表达及其与肿瘤内浸润T细胞亚群的相关性研究

前言

1 材料与方法

2 结果判定及统计分析

3 结果

4 讨论

第二部分 共刺激分子B7-H4对人外周血T细胞增殖周期、凋亡和分泌细胞因子的影响

前言

1 材料与方法

2 统计分析

3 实验结果

4 讨论

全文总结

附图

参考文献

文献综述 B7-H4的研究进展

致谢

攻读硕士学位期间发表的论文