干扰SEDL基因表达对软骨细胞生理活性的影响

摘要

目的：初步研究干扰SEDL基因表达后对人软骨细胞中II型胶原蛋白表达水平、内质网位置分布及超微结构和软骨细胞活性的影响。
　　方法：将靶向干扰SEDL基因的病毒转染入人软骨细胞中，QPCR及Wes tern Blot分别检测SEDL基因及Sedlin蛋白表达水平，评价干扰SED L基因的软骨细胞模型是否建立成功；免疫荧光及Western Blot检测II型胶原蛋白表达情况；荧光探针检测内质网位置分布改变；电镜检测内质网超微结构改变；MTT方法检测软骨细胞增殖活性情况。
　　结果：1.转染干扰SEDL基因病毒的软骨细胞SEDL基因表达明显降低，具有统计学差异（P<0.05）。Sedlin蛋白表达降低，表明干扰SEDL基因的细胞模型构建成功。2.随着Sedlin蛋白的减少，II型胶原蛋白表达量降低,具有统计学差异（P<0.05）。3.细胞模型中内质网分布发生改变，其形态变圆，触角变少，颜色变淡，细胞与细胞间内质网荧光排列不规则，紊乱。4.电镜下观察，细胞模型中内质网超微结构出现水肿扩张。5.转染干扰SEDL基因病毒的软骨细胞活性在48h达峰，之后细胞活性下降，且具有统计学差异（P<0.05）。
　　结论：Sedlin降低影响软骨细胞II型胶原蛋白表达，软骨细胞中内质网形态位置分布及超微结构发生改变，致使软骨细胞活性降低。

目录

英汉缩略语名词对照

前言

1材料与方法

1.1材料

1.2 方法

2 结果

2.1 LV-SiSEDL转入人软骨细胞（HC-a）后SEDL基因及Sedlin蛋白的影响

2.2 SEDT细胞模型中II型胶原蛋白表达水平

2.5 SEDT细胞模型中内质网改变情况

2.6 MTT法检测SEDT细胞模型的细胞活性

3 讨论

4 结论

全文总结

参考文献

文献综述:脊柱骨骺发育不良的研究进展

致谢

攻读学位期间发表的学术论文